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          食蟹猴和恒河猴SARS感染模型

(1)復(fù)制方法  年齡為3～6歲的健康恒河猴(Rhesus macaques)和食蟹猴(M. fascicularis)，按0.15ml/kg體重的劑量經(jīng)肌肉注射速眠新麻醉,，然后經(jīng)鼻內(nèi)和氣管內(nèi)感染SARS- CoV BJ01株(10的5.7次方TCID50/ml),。模型動(dòng)物在攻毒后第2、5,、7日的咽拭子均分離出病毒,，經(jīng)免疫熒光鑒定為SARS病毒。部分感染猴的肺部有出血點(diǎn)或出血斑,。所有感染猴均可出現(xiàn)不同嚴(yán)重程度的多灶性單核細(xì)胞性間質(zhì)性肺炎,，表現(xiàn)為肺泡間隔增寬、出血,、滲出,，肺泡腔內(nèi)有脫落的肺泡上皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，小支氣管和細(xì)支氣管也有上皮細(xì)胞脫落,；部分肺泡間隔出現(xiàn)少量以淋巴細(xì)胞為主的炎癥細(xì)胞浸潤,，肺泡腔內(nèi)偶見透明膜形成。免疫組化可在肺泡巨噬細(xì)胞和Ⅰ型上皮細(xì)胞中檢測到SARS病毒抗原,。感染動(dòng)物尸檢中,，在支氣管淋巴結(jié)和心肌中均能檢測到病毒RNA，并有炎癥改變,。多數(shù)模型動(dòng)物出現(xiàn)多灶性淋巴細(xì)胞性感染為主的肝炎,，并伴有個(gè)別肝細(xì)胞壞死。

(2)模型特點(diǎn)  模型動(dòng)物感染后出現(xiàn)病理學(xué)的改變,，肺臟是病毒感染的主要靶器官,，各肺葉均可見彌漫性肺泡損傷，形成透明膜,，出現(xiàn)單核細(xì)胞浸潤,。通過病毒學(xué)檢測及免疫學(xué)方法可從模型動(dòng)物血、咽拭子,、肺泡上皮細(xì)胞和支氣管淋巴結(jié)等組織樣品中檢測到SARS病毒RNA,，說明病毒能在非靈長類動(dòng)物體內(nèi)復(fù)制；并且有機(jī)體體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答,。部分感染猴的白細(xì)胞和血小板數(shù)量從感染第3日起出現(xiàn)一過性的降低,，然后逐漸恢復(fù)到正常的水平；動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生SARS病毒的專一性抗體,，感染后第2,、3、4周的血清抗 SARS-CoV特異性抗體水平均較高,。由此可見,，恒河猴可作為SARS病毒感染的動(dòng)物模型,，適用于SARS發(fā)病機(jī)制、藥物篩選,、疫苗評價(jià)的研究,。

(3)比較醫(yī)學(xué)  所有感染猴均未觀察到如高熱、干咳,、昏睡,、一過性的皮疹和呼吸困難等SARS典型臨床癥狀，有2/3的恒河猴出現(xiàn)一過性的低熱,；而所有食蟹猴的體溫均在正常的范圍內(nèi)波動(dòng),。但感染猴的肺組織病理變化，如彌漫性肺泡損傷,、單核細(xì)胞浸潤等均與人類感染SARS冠狀病毒后的肺組織病變基本類似,，且病理變化較人類輕。感染后模型動(dòng)物體內(nèi)可產(chǎn)生SARS專一性抗體,，感染4周左右時(shí)其血清中的抗體水平較高,，這與人類SARS患者相同；SARS患者體內(nèi)產(chǎn)生的特異性IgM抗體,，從7d開始出現(xiàn)至第11日可達(dá)到高峰,；而IgG抗體則于10d后產(chǎn)生，至20d達(dá)到高峰,；同時(shí)從感染猴的組織和分泌物中分離到病毒,。總之,，恒河猴感染SARS病毒的病理學(xué)改變與人類感染SARS病毒后出現(xiàn)的病理改變十分相似,，且非人靈長動(dòng)物具有與人相似的遺傳背景，所以可成為較為理想的SARS動(dòng)物模型,。但受到客觀條件的限制,，猴無法在大規(guī)模的研究中使用，這種限制降低了本模型的應(yīng)用價(jià)值,。