 |
上海申知心生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 高血脂癥動(dòng)物模型,心血管疾病動(dòng)物模型,缺血性心臟病動(dòng)物模型 |
會(huì)員.png)
11
聯(lián)系電話(huà)
|
上海申知心生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 高血脂癥動(dòng)物模型,心血管疾病動(dòng)物模型,缺血性心臟病動(dòng)物模型 |
聯(lián)系電話(huà)
2018-12-25 閱讀(2480)
動(dòng)物嗅球切除后可出現(xiàn)許多行為學(xué)改變,，如自發(fā)活動(dòng)增加、學(xué)習(xí)記憶功能降低,、應(yīng)激反應(yīng)增強(qiáng),、進(jìn)食和性行為改變等，這些可能與改變了不同腦區(qū)5-HT能系統(tǒng)功能有關(guān),。
(1)復(fù)制方法
1)手術(shù)方法 雄性大鼠,，體重為250～300g，手術(shù)前至少3～4d每日數(shù)次的撫摸,。將大鼠分組,，以水合氯醛(按350～400mg/kg體重的劑量)或戊丨巴丨比丨妥丨鈉(按50～60mg/ kg體重的劑量)經(jīng)腹腔注射麻醉后，剪除頭頸部毛發(fā),，皮膚常規(guī)消毒,。固定動(dòng)物在立體定位儀上，兩耳連線(xiàn)中點(diǎn)縱向?qū)⑵つw切開(kāi),，暴露顱骨,。在冠狀縫和矢狀縫交點(diǎn)向前7mm、旁開(kāi)2mm處用牙鉆分別鉆兩個(gè)2mm直徑的小孔,。用探針向下向前破壞嗅球后用真空泵吸出,。用止血海綿填充小孔(或用牙托粉水泥封孔)，縫合皮膚,，肌肉注射青霉素鈉鹽(每只4萬(wàn)U連續(xù)注射3d),。每組動(dòng)物按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)每天分別給予待測(cè)藥物或生理鹽水。術(shù)后14d左右即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。
實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)先解剖1～2只動(dòng)物觀(guān)察并測(cè)定鉆孔位置,，吸除嗅球時(shí)應(yīng)小心不要損傷額葉皮層。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后應(yīng)解剖去嗅球動(dòng)物以證實(shí)是否摘除嗅球,。
2)測(cè)試方法
①被動(dòng)回避實(shí)驗(yàn)
跳臺(tái)被動(dòng)回避 電擊箱(30cm×30cm×28cm)底部為金屬柵條可通電,，箱內(nèi)有一跳臺(tái)(7cm×30cm×4.5cm),。將大鼠先置于電擊箱內(nèi)(不予電擊)使之熟悉環(huán)境1min，然后將大鼠放在平臺(tái)上,，一旦大鼠觸及金屬柵條就遭遇0.6mA的電刺激,，直到大鼠在平臺(tái)上連續(xù)呆上3min或遭遇10次電擊為止,。記錄至此時(shí)大鼠遭電擊的總次數(shù),。
大鼠嗅球切除后遭受電擊的次數(shù)明顯增多，反映了嗅球切除可引起被動(dòng)回避反應(yīng)的欠缺,。給予抗抑郁藥后,，可減少動(dòng)物遭電擊的次數(shù)。
避暗被動(dòng)回避實(shí)驗(yàn)箱由明暗兩室組成,，兩室底部為不銹鋼柵條,，條間距離為1cm。兩室的隔板底部中央有一通道(7cm×7cm)供大鼠出入,。暗室的不銹鋼柵條與電刺激儀相聯(lián),，如果大鼠進(jìn)入暗室，則遭遇電擊,。將大鼠先放入暗室,，并給予一次電擊，大鼠將逃至明室,，當(dāng)大鼠重新進(jìn)入暗室時(shí),，將再次受到電擊，此時(shí)記錄為1次,，直到大鼠在明室連續(xù)呆上2min遭受電擊達(dá)20次,，記錄此時(shí)大鼠遭受電擊的總次數(shù)。
②主動(dòng)回避實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)箱內(nèi)設(shè)有條件刺激裝置,，為光刺激(實(shí)驗(yàn)箱兩長(zhǎng)側(cè)壁的底部裝有紅外光電管),；底部為不銹鋼柵條，與電擊裝置相連,，為非條件刺激(電擊刺激),。實(shí)驗(yàn)包括60個(gè)試行周期，每個(gè)周期分為條件刺激期,、非條件刺激期及間歇期,。如果大鼠在條件刺激期移動(dòng)并切斷兩端的光束，則可避免電擊,，記錄為“回避反應(yīng)”,。如果在非條件刺激期切斷光束，則電擊立即終止,，記錄為“逃避反應(yīng)”,。如果切斷光束發(fā)生于間歇期,，則記錄為“自發(fā)反應(yīng)”。
大鼠嗅球切除后,，回避反應(yīng)次數(shù)明顯增多,，逃避失敗次數(shù)顯著降低，表明嗅球切除后主動(dòng)回避反應(yīng)能力增強(qiáng),。當(dāng)給予抗抑郁藥后,，主動(dòng)回避反應(yīng)能力遭破壞。
(2)模型特點(diǎn)與比較醫(yī)學(xué) 由于嗅球與邊緣系統(tǒng)功能有關(guān),，影響行為,、情緒和內(nèi)分泌，因此大鼠切除雙側(cè)嗅球后被動(dòng)回避學(xué)習(xí)能力下降,、自主活動(dòng)能力增多,、主動(dòng)回避反應(yīng)能力增強(qiáng)等。這些反應(yīng)部分與嗅球切除后通過(guò)改變不同腦區(qū)5-HT能系統(tǒng)功能有關(guān),，抗抑郁藥能特異性地逆轉(zhuǎn)這些行為變化,。此模型的抑郁效果明顯、可靠性好,，且抑郁動(dòng)物的病理生理學(xué)改變與人類(lèi)抑郁相似,，對(duì)檢測(cè)抗抑郁劑有較高的選擇價(jià)值，常用于抗抑郁藥的次篩以及作用機(jī)制的研究,。其缺點(diǎn)在于對(duì)實(shí)驗(yàn)中手術(shù)技術(shù)的要求高和動(dòng)物的死亡率較高,。術(shù)前術(shù)后的每日撫摸對(duì)于減少術(shù)后動(dòng)物的易怒性及測(cè)試時(shí)的行為差異很重要。
