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硫代乙酰胺(TAA)誘發(fā)肝衰竭模型

2018-11-2 閱讀(2674)

硫代乙酰胺(TAA)誘發(fā)肝衰竭模型

(1)復制方法  成年大鼠,,硫代乙酰胺(TAA)經(jīng)腹腔注射250~350mg/kg體重,或經(jīng)皮下注射600mg/kg體重,,或灌胃300~400mg/kg體重,24h后均分別以原先的劑量和同途徑再給藥1次,。給藥后,,連續(xù)觀察模型動物的一般狀況,記錄其中毒死亡時間,,同時可行顱骨電極包埋手術記錄不同時點的腦電圖,,定時抽取血液作肝、腎功能測定,,在模型動物死亡或人為處死后,,摘取其肝臟組織作病理檢查。在整個實驗過程中,,模型動物均以10%葡萄糖生理鹽水作為惟一的飲用水,,也可靜脈注射量的5%葡萄糖注射液,每日2次,。

(2)模型特點  模型動物在第二次給藥后8h起,,出現(xiàn)尿黃,精神萎靡,,對外周刺激反應遲鈍或進行性減弱,,24h時,血清ALT,、BT,、TNF-a異常升高,隨后雖有逐步回落的趨勢,,但72h內(nèi)一直維持在較高水平,。此外,全血和血漿黏度增加,,紅細胞壓積(HCT)提高、紅細胞聚集指數(shù)(EAI)上升,,血清AST,、BUN、λ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT),、脂蛋白-x(LP-x),、內(nèi)毒素(ET)含量提高,紅細胞剛性指數(shù)(IR)下降。病理檢查可見,,模型動物肝臟普遍充血腫大,,呈暗紅色,表面有粗糙顆粒,;光鏡示,,肝臟大片壞死,肝細胞出現(xiàn)水腫和氣球樣變,,匯管區(qū)有炎癥細胞浸潤,,以中央靜脈為中心,肝小葉呈點狀和灶狀壞死,。此時,,模型動物翻正反射消失,體顫等共濟失調(diào)表現(xiàn)明顯,,并隨時間而逐步發(fā)展為嗜睡或昏迷狀,,部分動物出現(xiàn)死亡,死亡時間多發(fā)生在48h內(nèi),。死亡動物口唇,、尾部、足部等處有出血和淤點,。此外,,模型動物腦電圖顯示有典型的肝性腦病三相波(δ波)出現(xiàn)。

(3)比較醫(yī)學  硫代乙酰胺(TAA)是一種肝毒性物質(zhì),,用其復制肝衰竭動物模型,,具有肝實質(zhì)細胞受損和肝功能衰竭的典型特征,主要表現(xiàn)為:血清ALT,、AST,、ALP活性升高,肝細胞膜Na+-K+-ATP酶活性降低,,血清TBIL,、 BUN、ET含量上升,,血漿凝血因子水平下降,,PT延長,全血和血漿黏度增加,,血液和腦室內(nèi)NH3,、AAA和氨基丁酸等神經(jīng)毒質(zhì)濃度提高,腦電頻率減慢,,波幅增大,,出現(xiàn)典型的三相波變化,。TAA誘導肝衰竭的作用機制除直接損害肝實質(zhì)細胞外,還可使肝巨噬細胞功能降低,、腸源性內(nèi)毒素血癥形成,,后者進一步加重對肝組織的損害。有實驗證明,,不同劑量的TAA對模型動物的肝實質(zhì)細胞損傷和肝性腦病的嚴重程度呈顯著相關,。TAA劑量越大,內(nèi)毒素和血氨水平越高,,肝功能損害和肝臟病理變化越明顯,,肝性腦病分級評分越高,存在明顯的量一效關系,。如給大鼠腹腔注射TAA250mg/kg體重或350mg/kg體重,,雖然兩種劑量均能導致100%動物發(fā)生臨床型肝性腦病,但前者分級多為1~2級,,無動物死亡,,而后者分級則多為3~4級,且動物死亡率達41.7%,。由于本模型方法簡便,,價格低廉,且與D-GLA肝衰竭所致急性肝功能衰竭動物模型比,,模型特征明確,,病程相對緩慢,分期易于掌握,,所以近年來受到了國內(nèi)外研究人員的較多重視和應用,。但是,本模型一般多局限于以小動物為模型對象,,所以其使用的廣泛性受到限制,。



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