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上海申知心生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 高血脂癥動(dòng)物模型,心血管疾病動(dòng)物模型,缺血性心臟病動(dòng)物模型 |
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2018-11-2 閱讀(2194)
(1)復(fù)制方法 采用經(jīng)額蛛網(wǎng)膜下腔插管直達(dá)大腦動(dòng)脈(Willis)環(huán)處2次注血制成大白鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后DCV模型。
健康大鼠,，體重為200～250g,，雌雄不拘,，經(jīng)腹腔注射水合氯醛(按350～400mg/kg體重的劑量)或戊丨巴丨比丨妥丨鈉(按50～60mg/kg體重的劑量)麻醉大鼠,，剃除頭頂部毛發(fā),，手術(shù)區(qū)域皮膚消毒,。切開(kāi)頭頂部中線皮膚,，鈍性分離肌肉及骨膜,。距前囟前5mm、中線旁3mm處用電動(dòng)牙科鉆鉆孔達(dá)腦膜,，此骨孔恰好在前顱窩底與額極交接處,。適當(dāng)擴(kuò)大骨孔，在手術(shù)顯微鏡下小心挑破腦膜,，當(dāng)清亮腦脊液流出時(shí)將PC-10塑料管指向雙耳連線中點(diǎn),、緊貼前顱底蛛網(wǎng)膜下腔送入,，深度8～10mm(經(jīng)解剖測(cè)量此長(zhǎng)度導(dǎo)管頂端恰位于大腦動(dòng)脈(Willis)環(huán)前部)，連接注射器回抽有清亮腦脊液而無(wú)血液,，提示穿刺成功,。用骨蠟封閉骨創(chuàng)口，縫合肌肉并固定穿刺管,。再于距前囟后3mm,、中線旁3mm處左或右鉆一骨孔，挑破腦膜,，插入測(cè)量電極于皮層內(nèi)(深度1mm),，用于局部腦血流(rCBF)的測(cè)定。
斷尾取自體血150μl經(jīng)PC-10管緩慢注入蛛網(wǎng)膜下腔后,，灼封塑料管并縫合皮膚,。24h后同上述麻醉固定,，剪開(kāi)塑封管,，再次注入自體血100μl。于末次注血6h后用生理
鹽水灌冼,，4％多聚甲醛灌注固定,，先快后慢，斷頭取腦,，行大體及形態(tài)學(xué)觀察,。也可于末次注血6h后先進(jìn)行腦血管造影以觀察全腦血管痙攣情況。方法：麻醉后切開(kāi)頸部皮膚,，分離頸總動(dòng)脈,，經(jīng)頸內(nèi)動(dòng)脈插管至顱底，注入60％泛影葡胺1ml進(jìn)行全腦造影,。
(2)模型特點(diǎn) rCBF測(cè)定顯示局部血流量明顯降低,。大體觀察可見(jiàn)大量血液積聚于大腦動(dòng)脈(Willis)環(huán)處，大腦前中動(dòng)脈,、基底動(dòng)脈均被陳舊性血凝塊包裹,，前顱窩底、蝶鞍及后顱窩處均有陳舊性血凝塊殘留,。微血管形態(tài)學(xué)觀察可見(jiàn)微血管管徑縮小,。圖像分析可見(jiàn)血管總面積、血管數(shù)及平均血管面積均明顯降低,。
(3)比較醫(yī)學(xué) 目前對(duì)DCV產(chǎn)生的機(jī)制有諸多觀點(diǎn),，但多傾向于是一種功能改變而非結(jié)構(gòu)改變。由于進(jìn)行灌注固定時(shí)灌注壓,、pH值,、理化因素等對(duì)大動(dòng)脈的影響，觀察大動(dòng)脈的病變并不能真實(shí)地反映DCV的改變。以微血管的改變來(lái)反映DCV比大腦動(dòng)脈環(huán)周?chē)笱艿母淖儊?lái)反映更可靠,。經(jīng)小腦幕上蛛網(wǎng)膜下腔直達(dá)大腦動(dòng)脈環(huán)周?chē)闹苯幼⒀ǜ诱鎸?shí)地模擬了SAH的病理過(guò)程,，且操作簡(jiǎn)單，出血易于控制,，是一個(gè)較為可靠的SAH模型,。由于該模型可重復(fù)性好，適用于DCV的研究,。
