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上海申知心生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： 高血脂癥動物模型,心血管疾病動物模型,缺血性心臟病動物模型 |
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2018-9-13 閱讀(2282)
1 兩動脈阻斷法(occlusion of bilaterial carotis communis artery)
(1)復制方法 SD大鼠,，雌雄不拘，體重為250～300g,。經(jīng)腹腔注射水合氯醛(350～400mg/kg體重的劑量)或戊丨巴丨比丨妥丨鈉(50～60mg/kg體重的劑量)麻醉后,，仰臥位固定，剃除頸部毛發(fā),，手術區(qū)域皮膚常規(guī)消毒,。頸前正中切口,，分離雙側頸總動脈(carotis communis artery, OCA),，夾閉雙側CCA，同時合并低血壓以減少腦血流量,，造成急性腦缺血,。由于嚙齒動物(沙土鼠除外)腦血液循環(huán)有較人類豐富的側支循環(huán)，僅結扎雙側CCA不足以明顯降低腦血流量(CBF),，因此結合降壓藥三丨甲噻吩,、酚妥拉明或靜脈放血等方法使動脈血壓降低至50mmHg(6.7kPa)，使CBF降低至正常的5％～15％,。放血方法：由頸靜脈插管至右心房,，供放血并連續(xù)記錄EEG。采用抽血的方法放血,，失血達80mmHg(10.7kPa)時結扎雙側頸動脈,，再繼續(xù)抽血，使血壓降至6.7kPa,。
(2)模型特點 此方法的優(yōu)點是操作簡便,，用一次性手術即可完成，阻斷可逆,，可人為控制動物呼吸,。采用這種方法復制的模型，能進行缺血再灌流損傷的研究,，模擬了臨床上休克,、心功能不全、腦血管嚴重狹窄或阻塞合并血液低灌流引起的腦循環(huán)障礙,，造成不同程度的腦組織缺血損傷,。因而，對于探討人類缺血性腦損傷的發(fā)病規(guī)律,，評價抗腦缺血藥物的療效等有價值,。缺點是：①模型不能在清醒動物上復制,，無法研究血管狹窄后行為學的變化。②常因存在側支循環(huán)而造成缺血不,，部位不宜確定,。③腦缺血時限長，有時導致腦缺血后抽搐,、癲癎等并發(fā)癥的發(fā)生,。且由于低血壓狀態(tài)，可干擾其他器官,、組織的供血和實驗結果,。此方法除可用于大鼠外，也可用于兔,、貓和猴的性腦缺血,。
2 四動脈阻斷法(occlusion of four blood vessels)
(1)復制方法 SD大鼠，雌雄不拘,，體重為250～300g,。經(jīng)腹腔注射水合氯醛(350～400mg/kg體重的劑量)或戊丨巴丨比丨妥丨鈉(50～60mg/kg體重的劑量)麻醉后，仰臥位固定,，剃除頸部毛發(fā),，手術區(qū)域皮膚常規(guī)消毒。頸前正中切口,，分離雙側頸CCA,，套線備用。同時枕部切口(頸部前傾30°,，利于手術部位的暴露),，借助手術顯微鏡分離暴露頸椎橫突翼并找左右橫突孔(椎動脈在入腦前從此孔下通過)，將灼熱的電烙鐵尖頭(直徑：0.5mm)直接插入翼突孔,，深度以2～3mm為宜,，電凝雙側椎動脈(vertebral artery, VA)造成永丨久性閉塞。插入時間不宜過長,，1～2s即可,，避免造成局部產(chǎn)熱過高而損傷脊髓和腦干。電烙鐵拔出時宜緩不宜急,，以免將椎動脈燒斷部位拉破,，引起動物大量出血導致死亡。也可采用鉆透頸椎小孔的方法,，在直視下直接燒灼VA,，成功率100％。24h后用乙丨醚淺麻醉大鼠(也可在清醒狀況下手術)，頸部常規(guī)消毒,，打開頸前正中切口,，將套在雙側頸總動脈下的備用線結扎(也可用微型無創(chuàng)動脈夾夾閉兩側 CCA)，根據(jù)實驗需要可阻斷血流10～60min,。松開結扎線(或動脈夾)后可實行再灌注研究,。
(2)模型特點 本模型是一個能夠導致嚴重大腦缺血，具有較強可復制性的誘發(fā)模型,。優(yōu)點是缺血,，檢驗缺血是否成功的指標明確，且可進行缺血再灌注研究,。缺點是手術復雜,，成功率低，個體差異大,，術后存活率為50％～80％,。在手術過程中翼突孔的區(qū)分是阻斷VA的關鍵，在翼突孔前上方有一小切口,，若肌肉分離不,，易將該切口誤認為是翼突孔，若在此處燒灼,，不但不能阻斷VA，而且易燒傷脊髓,，甚至腦干,，引起動物立即死亡。
3 全腦反復缺血再灌注(reperfusion after complete cerebral ischemia)
1.兩動脈阻斷后再灌注 按兩動脈阻斷法暴露雙側頸總動脈后,，在雙側頸總動脈下用已穿好的備用線結扎或微型無創(chuàng)動脈夾阻斷雙側頸總動脈血流(10～60min),，之后松開結扎線(或動脈夾)實行再灌注，可進行反復缺血再灌注研究,。
2.四動脈阻斷后再灌注 按四動脈阻斷法實施四動脈阻斷24h后,，再次暴露雙側頸總動脈，用微動脈夾可逆性夾閉雙側頸總動脈5min,，反復3次,，每次間隔1h，隨后恢復供血,，縫合創(chuàng)口,。
