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貨物所在地:上海上海市
所在地: 進(jìn)口,、國(guó)產(chǎn)
更新時(shí)間:2025-02-24 21:00:07
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產(chǎn)品名稱 | 感覺(jué)態(tài)細(xì)胞 |
包裝 | 100ul*20 |
分類 | 克隆感受態(tài)細(xì)胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,,貨號(hào)21875-091),,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%,。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存,。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,,5分鐘后待菌塊融化,,加入目的DNA(質(zhì)粒或連接產(chǎn)物)并用手撥EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),,冰中靜置25分鐘,。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無(wú)菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),,混勻后37℃,,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上,。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。如果進(jìn)行藍(lán)白斑篩選操作,,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時(shí),。
存
玉米赤霉烯酮快速檢測(cè)卡
萊克多巴胺(ractopamine)快速檢測(cè)卡
三聚氰胺(Melamine)快速檢測(cè)卡
鹽酸克倫特(瘦肉精)檢測(cè)卡
沙丁胺醇快速檢測(cè)卡
產(chǎn)品名稱
人類MTHFR和MTRR基因多態(tài)性檢測(cè)試劑盒
人類ALDH2基因多態(tài)性檢測(cè)試劑盒
人類CYP2C19基因多態(tài)性檢測(cè)試劑盒
人類CYP2C9和VKORC1基因多態(tài)性檢測(cè)試劑盒
人類CYP2D6基因多態(tài)性檢測(cè)試劑盒
人類UGT1A1基因多態(tài)性檢測(cè)試劑盒
人類TP53基因突變檢測(cè)試劑盒
結(jié)核分枝桿菌特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)檢測(cè)試劑盒(IGRA)
核酸提取試劑盒(YC-A)
核酸提取試劑盒(YC-G)
黃曲霉PCR試劑盒
續(xù)斷苷B化學(xué)對(duì)照品HPLC≥95%20mg
感覺(jué)態(tài)細(xì)胞二氫大豆苷化學(xué)對(duì)照品HPLC≥95%20mg
氧化表小檗堿化學(xué)對(duì)照品HPLC≥95%20mg
寶藿苷V化學(xué)對(duì)照品HPLC≥98%20mg
寶藿苷VII化學(xué)對(duì)照品HPLC≥98%20mg
槐黃醇化學(xué)對(duì)照品HPLC≥98%20mg
鴉膽子素 D化學(xué)對(duì)照品HPLC≥98%20mg去氫紫堇堿化學(xué)對(duì)照品HPLC≥98%20mg
1,4-二[4-(葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋果酸酯化學(xué)對(duì)照品HPLC≥98%20mg
丹參酮甲酯化學(xué)對(duì)照品HPLC≥98%20mg
20R-人參皂苷Rg2化學(xué)對(duì)照品HPLC≥98%20mg
三七素化學(xué)對(duì)照品HPLC≥98%20mg
齒孔酸; 齒孔菌酸化學(xué)對(duì)照品HPLC≥96.5%20mg
馬兜鈴內(nèi)酰胺A化學(xué)對(duì)照品HPLC≥98%20mg
注意事項(xiàng):
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細(xì)胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標(biāo)DNA,,不可在冰中放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),,長(zhǎng)時(shí)間存放會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時(shí)應(yīng)輕柔操作,。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或高效率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少終用于涂板的菌量,。
操作步驟:
1.取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中,。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實(shí)際情況分裝使用。以下實(shí)驗(yàn)以50μl感受態(tài)細(xì)胞為例,。
2.待感受態(tài)細(xì)胞融化后,,向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實(shí)際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),,用移液器輕輕吹打混勻,,冰浴30分鐘,。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,,冰上靜置2-3分鐘
4.每個(gè)離心管中加入450μl無(wú)菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),,混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇
5.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,,加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無(wú)菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開(kāi),,將平板置于37℃直至液體被吸收,,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時(shí),。
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)