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原代腫瘤細胞培養(yǎng)體系

是一個為體外生長的人、大鼠、小鼠,、兔等哺乳動物的腫瘤細胞設計的理想的培養(yǎng)基方案,。本體系是一個基于碳酸氫鹽的緩沖體系,，可以在孵育的5%的CO2的氣體環(huán)境下維持一個圍繞pH7.2的酸堿緩沖體系,。本體系是一個無菌的液體混合系統(tǒng),，其中包含必須和非必須氨基酸,、維生素,、激素、生長因子,、微量元素和一些其他的有機和無機化合物以及胎牛血清（10%）,。本培養(yǎng)體系是基于固定配方配制的液態(tài)培養(yǎng)體系，可以為體外培養(yǎng)的人,、大鼠,、小鼠、兔等哺乳動物的腫瘤細胞提供一個確定適宜的平衡營養(yǎng)環(huán)境,，并且可以選擇性的促進腫瘤細胞的擴增,。

運輸

放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法

基礎培養(yǎng)基2℃～8℃,，培養(yǎng)添加劑 -20℃，避光,，保存12個月,。配置好的培養(yǎng)基2℃～8℃保存1-2個月。

體系組成

產品使用

1） 本產品僅能用于科研

2） 本產品未通過直接用于活體動物和人的審核

3） 本產品未通過用于活體診斷的審核

注意事項

1,、收到產品請先檢查包裝是否完好，如有破損,，漏液,、渾濁等現象請及時聯系我們，培養(yǎng)基凍融后,，可能會有少量絮狀物析出,，不影響產品正常使用。

2,、請仔細閱讀產品說明書,，了解產品使用方法、保存方式,、有效期等信息，若因操作失誤,，保存不當而導致產品出現污染等問題的,，責任由客戶自行承擔。

3,、本產品僅能用于科研,，培養(yǎng)基中的一些組分對人體有較低的危害性，如有接觸立即用大量清水沖洗即可,。

注意事項：

（1）無菌操作：細菌或霉菌污染是培養(yǎng)失敗的常見原因,，必須加強各個環(huán)節(jié)的無菌操作觀念，以預防為主,，一旦污染,，一般很難消除。

（2）培養(yǎng)液：所用的培養(yǎng)液必須滿足細胞生存和生長的必要條件,。由于細胞來源的動物種類,、組織類型不同，對培養(yǎng)液的要求有一定的差異,，必要時可用預實驗的方法選擇適當的培養(yǎng)液,。

（3）胎牛血清：胎牛血清對于維持培養(yǎng)細胞的生存和促進細胞增殖起著關鍵性作用,。可選擇多種不同批號的胎牛血清進行小樣分析,。一旦確定某一廠家的某一批號胎牛血清后,，就保持應用至實驗完成。想了解血清的秘密,，可以參考Nothing：關于血清,，你不知道的太多了

（4）：必須新鮮配制，貯存時間過長(即使是-20℃低溫保存),，也將影響消化效力,，導致消化時間過長，細胞損傷增加,。

（5）L-幾乎所有細胞對有較高的要求,，細胞需要核酸和蛋白質，在缺時,，細胞會因生長不良而死亡,。液中很不穩(wěn)定，加有養(yǎng)液在4℃冰箱貯存兩周以上時,，就應重新加入原來量的

（6）靜置培養(yǎng)：原代細胞在消化分離后,，置于CO2培養(yǎng)箱的頭24～48h (必要時72h)內，應處于絕對靜置狀態(tài),，切忌不時地取出培養(yǎng)瓶觀察生長狀況,，這將使原代分離細胞難以貼壁，更談不上伸展和增殖,，初學者尤應注意,。不必擔心培養(yǎng)液中的營養(yǎng)成分會消耗光，在細胞增殖之前對營養(yǎng)的要求并不大,。原代培養(yǎng)初期僅加一薄層培養(yǎng)液的目的也在于有利于細胞貼壁伸展,。

（7）消化時間：一般消化至肉眼尚可見微小組織顆粒即可，因為此時組織顆粒已經松散,，略經吹打即成細胞團或單個細胞,，過久的消化往往導致細胞損傷加重，細胞培養(yǎng)成活率降低,。

（8）其他生長因子：經過以上處理,，一般原代分離細胞培養(yǎng)均可以成功。對于少數特殊類型細胞也可以考慮加一些特殊的生長因子,，如胰島素能促使細胞攝取葡萄糖和氨基酸,。另外，內毒素、EGF,、FGF等均有促有絲分裂作用,，但費用較高。

細胞培養(yǎng)最初認識：

什么是細胞培養(yǎng),？ 細胞培養(yǎng)是指將細胞從動物或植物體內取出,，然后在適宜的人工環(huán)境中生長的過程。細胞可以在培養(yǎng)前直接從組織中取出并通過酶或機械方法進行解離,，也可以來源于已建立的細胞系或細胞株,。

原代培養(yǎng)：

原代培養(yǎng)是指細胞從組織中分離出來后，在適宜條件下增殖,，直到它們占據所有可用的基質（即達到匯合狀態(tài)）的培養(yǎng)階段,。在此階段，必須通過將細胞轉移到含有新鮮生長培養(yǎng)基的新容器中進行繼代培養(yǎng)（即傳代）,，以為其提供更多的繼續(xù)生長空間,。

細胞系：

第一次傳代培養(yǎng)后，原代培養(yǎng)物即被稱為細胞系,。來自于原代培養(yǎng)的細胞系壽命有限（即：有限細胞系）,，隨著細胞的傳代，生長能力的細胞會占據優(yōu)勢,，最終導致細胞群體在基因型和表型上達到一定程度的均一性,。

細胞株：

如果通過克隆或其他方法從培養(yǎng)物中陽性篩選出了細胞系的亞群，則該細胞系成為一個細胞株,。與親代細胞系起始時相比,，細胞株通常會獲得一些其他的遺傳學改變。

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