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原代內(nèi)膜細胞培養(yǎng)體系

是一個為體外生長的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳動物器官中的內(nèi)膜細胞設計的理想的培養(yǎng)基方案。本體系是一個基于碳酸氫鹽的緩沖體系,，可以在孵育的5%的CO2的氣體環(huán)境下維持一個圍繞pH7.2的酸堿緩沖體系。本體系是一個無菌的液體混合系統(tǒng)，其中包含必須和非必須氨基酸,、維生素、激素,、生長因子,、微量元素和一些其他的有機和無機化合物以及胎牛血清（10%）。本培養(yǎng)體系是基于固定配方配制的液態(tài)培養(yǎng)體系,，可以為體外培養(yǎng)的人,、大鼠、小鼠,、兔等哺乳動物器官中的內(nèi)膜細胞提供一個確定適宜的平衡營養(yǎng)環(huán)境,，并且可以選擇性的促進內(nèi)膜細胞的擴增,。

運輸

放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法

基礎培養(yǎng)基2℃～8℃，培養(yǎng)添加劑 -20℃,，避光,，保存12個月。配置好的培養(yǎng)基2℃～8℃保存1-2個月,。

體系組成

產(chǎn)品使用

1） 本產(chǎn)品僅能用于科研

2） 本產(chǎn)品未通過直接用于活體動物和人的審核

3） 本產(chǎn)品未通過用于活體診斷的審核

注意事項

1、收到產(chǎn)品請先檢查包裝是否完好,，如有破損,，漏液、渾濁等現(xiàn)象請及時聯(lián)系我們,，培養(yǎng)基凍融后,，可能會有少量絮狀物析出，不影響產(chǎn)品正常使用,。

2,、請仔細閱讀產(chǎn)品說明書，了解產(chǎn)品使用方法,、保存方式,、有效期等信息，若因操作失誤,，保存不當而導致產(chǎn)品出現(xiàn)污染等問題的,，責任由客戶自行承擔。

3,、本產(chǎn)品僅能用于科研,，培養(yǎng)基中的一些組分對人體有較低的危害性，如有接觸立即用大量清水沖洗即可,。

注意事項：

（1）無菌操作：細菌或霉菌污染是培養(yǎng)失敗的常見原因,，必須加強各個環(huán)節(jié)的無菌操作觀念，以預防為主,，一旦污染,，一般很難消除。

（2）培養(yǎng)液：所用的培養(yǎng)液必須滿足細胞生存和生長的必要條件,。由于細胞來源的動物種類,、組織類型不同，對培養(yǎng)液的要求有一定的差異,，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液,。

（3）胎牛血清：胎牛血清對于維持培養(yǎng)細胞的生存和促進細胞增殖起著關鍵性作用,。可選擇多種不同批號的胎牛血清進行小樣分析,。一旦確定某一廠家的某一批號胎牛血清后,，就保持應用至實驗完成。想了解血清的秘密,，可以參考Nothing：關于血清,，你不知道的太多了

（4）：必須新鮮配制，貯存時間過長(即使是-20℃低溫保存),，也將影響消化效力,，導致消化時間過長，細胞損傷增加,。

（5）L-幾乎所有細胞對有較高的要求,，細胞需要核酸和蛋白質(zhì)，在缺時,，細胞會因生長不良而死亡,。液中很不穩(wěn)定，加有養(yǎng)液在4℃冰箱貯存兩周以上時,，就應重新加入原來量的

（6）靜置培養(yǎng)：原代細胞在消化分離后,，置于CO2培養(yǎng)箱的頭24～48h (必要時72h)內(nèi)，應處于絕對靜置狀態(tài),，切忌不時地取出培養(yǎng)瓶觀察生長狀況,，這將使原代分離細胞難以貼壁，更談不上伸展和增殖,，初學者尤應注意,。不必擔心培養(yǎng)液中的營養(yǎng)成分會消耗光，在細胞增殖之前對營養(yǎng)的要求并不大,。原代培養(yǎng)初期僅加一薄層培養(yǎng)液的目的也在于有利于細胞貼壁伸展,。

（7）消化時間：一般消化至肉眼尚可見微小組織顆粒即可，因為此時組織顆粒已經(jīng)松散,，略經(jīng)吹打即成細胞團或單個細胞,，過久的消化往往導致細胞損傷加重，細胞培養(yǎng)成活率降低,。

（8）其他生長因子：經(jīng)過以上處理，一般原代分離細胞培養(yǎng)均可以成功,。對于少數(shù)特殊類型細胞也可以考慮加一些特殊的生長因子,，如胰島素能促使細胞攝取葡萄糖和氨基酸。另外,，內(nèi)毒素,、EGF,、FGF等均有促有絲分裂作用，但費用較高,。

細胞培養(yǎng)最初認識：

什么是細胞培養(yǎng),？ 細胞培養(yǎng)是指將細胞從動物或植物體內(nèi)取出，然后在適宜的人工環(huán)境中生長的過程,。細胞可以在培養(yǎng)前直接從組織中取出并通過酶或機械方法進行解離,，也可以來源于已建立的細胞系或細胞株。

原代培養(yǎng)：

原代培養(yǎng)是指細胞從組織中分離出來后,，在適宜條件下增殖,，直到它們占據(jù)所有可用的基質(zhì)（即達到匯合狀態(tài)）的培養(yǎng)階段。在此階段,，必須通過將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮生長培養(yǎng)基的新容器中進行繼代培養(yǎng)（即傳代）,，以為其提供更多的繼續(xù)生長空間。

細胞系：

第一次傳代培養(yǎng)后,，原代培養(yǎng)物即被稱為細胞系,。來自于原代培養(yǎng)的細胞系壽命有限（即：有限細胞系），隨著細胞的傳代,，生長能力的細胞會占據(jù)優(yōu)勢,，最終導致細胞群體在基因型和表型上達到一定程度的均一性。

細胞株：

如果通過克隆或其他方法從培養(yǎng)物中陽性篩選出了細胞系的亞群,，則該細胞系成為一個細胞株,。與親代細胞系起始時相比，細胞株通常會獲得一些其他的遺傳學改變,。

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