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參考價 | ¥2600-¥6000 | /件 |
參考價:¥2600 ~ ¥6000
更新時間:2024-12-07 10:00:48瀏覽次數(shù):391評價
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
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貨號 | EY-XY3787 | 應用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 生長特性 | 懸浮生長 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 組織來源 | 實驗動物脾臟 |
種屬來源 | 兔 |
產(chǎn)品名稱 | 兔脾臟NK細胞 | 貨號 | EY-XY3787 |
英文名稱 | rabbit spleen NK cells | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
細胞鑒定:經(jīng)鑒定細胞純度高于90%
支原體檢測:兔脾臟NK細胞不含有 HIV-1,、 HBV、HCV,、支原體,、細菌,、酵母和真菌
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基:兔脾臟NK細胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳,;溫度:37℃
凍存條件:無血清凍存液,,液氮儲存
細胞代數(shù):第1代
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,,1周左右
運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應限制僅限于科學研究,,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
自然殺傷細胞(natural killer cell,NK)是機體重要的免疫細胞,,不僅與抗腫瘤,、 抗病毒感染和免疫調(diào)節(jié)有關(guān),而且在某些情況下參與超敏反應和自身免疫性疾病的發(fā)生,。一種穩(wěn)定表達在NK和LAK細胞表面的LAK-1分子,,120kDa,NK細胞在IL-2條件下培養(yǎng)20天LAK-1仍為陽性,,而HNK-1(CD57)和CD16部分消失,。LAK的殺傷活性可被抗LAK-1 McAb所抑制,。 |
收貨處理取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,,拆下封口膜,,放入37℃、5%CO2,,飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)
傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例傳代建議1:2傳代,,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細胞一次,;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,,吸出多余消化液,,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,,待細胞回縮變圓后,,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4.待細胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察,;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
1.準備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面,,紫外線消毒20分鐘,。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部,。
2.布局:點燃酒精燈,,安裝吸管帽。
3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,,用Hanks液漂洗2~3次,,去除血污;如懷疑組織可能污染,,可先置于含有青的混合液中30~60分鐘,。
4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液,,然后一并倒入三角燒瓶中,,結(jié)扎瓶口或塞以膠塞。
5.消化:或用恒溫水浴,,或置于37℃溫箱消化均可,,消化中每隔20分鐘應搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好,。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定,。
6.分離:在消化過程中見消化液發(fā)混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,,如組織已分散成細胞團或單個細胞,,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,,濾掉尚未充分消化開的組織塊,。低速(500~1000轉(zhuǎn)/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,,加入適量含有血清的培養(yǎng)液,。
7.計數(shù):用計數(shù)板計數(shù),如細胞懸液細胞密度過大,,再補加培養(yǎng)液調(diào)整后,,分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說,,pH要求在7.2~7.4范圍,,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,,說明液體變酸,,可用NaHCO3調(diào)整。
8.培養(yǎng):置于36.5℃溫箱培養(yǎng),,如用CO2溫箱培養(yǎng),,瓶蓋需擰松半圈。
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