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參考價(jià) | ¥2600-¥6000 | /件 |
參考價(jià):¥2600 ~ ¥6000
更新時(shí)間:2024-12-07 08:24:13瀏覽次數(shù):304評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
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貨號(hào) | EY-XY3738 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 生長特性 | 貼壁生長 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 英文名稱 | Breast Ductal Epithelial Cells |
種屬來源 | 小鼠 |
原代細(xì)胞的分離培養(yǎng):
原代培養(yǎng)即直接從有機(jī)體取下細(xì)胞,、組織或器官,讓它們?cè)隗w外維持與生長,。原代培養(yǎng)的特點(diǎn)是細(xì)胞或組織剛離開機(jī)體,,它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變,在一定程度上可反映它們?cè)隗w內(nèi)的狀態(tài),,表現(xiàn)出來源組織或細(xì)胞的特性,, 因此用于藥物實(shí)驗(yàn),尤其是藥物對(duì)細(xì)胞活動(dòng),、結(jié)構(gòu),、代謝、有無毒性或殺傷作用等,,是的工具,。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法,。
(一)組織塊培養(yǎng)法
許多實(shí)驗(yàn)室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進(jìn)行原代培養(yǎng),,因?yàn)榉椒ê唵危?xì)胞也較容易生長,。尤其是培養(yǎng)心肌,,有時(shí)還可觀察到心肌組織塊搏動(dòng)。細(xì)胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后,, 即可進(jìn)行傳代,。
1. 設(shè)備材料
培養(yǎng)箱、冰箱,、超凈工作臺(tái)/無菌間,、無菌吸管、離心管,、酒精燈,、試管架、培養(yǎng)瓶,、培養(yǎng)皿,、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清,、Hanks 溶液,、雙抗試液、剪刀,、攝子,、小燒杯。
2. 操作步驟
(1) 在無菌條件下,,取待培養(yǎng)的組織適量,,置入小燒杯中, 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次,,去掉組織塊表面的血污,。
(2)用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊。
(3)再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗,, 直至液體不混濁為止,。等組織塊下沉,將燒杯傾斜,,用小吸管盡量吸除Hanks 溶液,。
(4)用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培養(yǎng)液再清洗,,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培養(yǎng)液,。
(5)用彎頭吸管吸取組織小塊,均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面,,吸去多余的培養(yǎng)液,,各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養(yǎng)皿蓋,,做好標(biāo)記,, 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi)。
(6) 2~4h 后,,于超凈工作臺(tái)中,,緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20%血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培養(yǎng)液少量,以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中,。
(7)輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱,, 如無特殊情況,不必觀察,。1~2 周后,,可觀察到細(xì)胞從組織塊邊緣長出,形成生長暈。
(9) 一般說來,,若培養(yǎng)液無明顯改變,, 1 周換液1 次即可。待細(xì)胞長滿整個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)表面,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
小鼠乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞
細(xì)胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱 | 小鼠乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞 | 組織來源 | 乳腺 |
種屬 | 小鼠 | 生長特性 | 貼壁生長 |
形態(tài)特征 | 上皮細(xì)胞樣 | 英文名稱 | Breast Ductal Epithelial Cells |
貨號(hào) | EY-XY3738 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質(zhì)量檢測:細(xì)胞角蛋白(PCK)免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基:小鼠乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳,;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,,1周左右
運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹:
小鼠腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,小鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞分離自腦動(dòng)脈組織,;腦動(dòng)脈有成對(duì)的頸內(nèi)動(dòng)脈和椎動(dòng)脈互相銜接成動(dòng)脈循環(huán);靜脈系多不與同名動(dòng)脈拌行,,所收集的靜脈血先進(jìn)入靜脈竇再匯入頸內(nèi)靜脈,;各級(jí)靜脈都沒有瓣膜。它包括腦的動(dòng)脈系統(tǒng)和腦的靜脈系統(tǒng),。腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,,呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,,核卵圓形,、居中;2周后細(xì)胞匯合,,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,,有分枝狀突起,,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長 |
公司正在出售的產(chǎn)品:
鋅指蛋白RIZ1抗體
組織半-9(CASPASE-9)活性比色法定量檢測試劑盒
40%ACRYLAMIDE-BIS(19:1)溶液
線蟲甲磺酸乙脂(EMS)誘導(dǎo)突變?cè)噭┖?/span>
DAP KINASE蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒
動(dòng)物源性食品鴨源基因檢測試劑盒
MAYER蘇木素復(fù)染試劑盒
植物酸性磷酸酶總活性比色法定量檢測試劑盒
植物超氧化物歧化酶(SOD)亞型制備試劑盒
冰凍切片神經(jīng)組織金屬鋅改良蒂姆(Neo-TIMM)染色試劑盒
雙磷脂酰甘油DPG(diphosphatidylglycerol)高效液相色譜法定量檢測試劑盒
αSMA蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒
果菜乙醛比色法定量檢測試劑盒
冰凍切片組織RUNX3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒
基質(zhì)金屬(MMP)羧甲基轉(zhuǎn)
純化線粒體內(nèi)膜功能/膜電位紅色熒光(TMRE)測定試劑盒
粘結(jié)蛋白SA1抗體
甘油酯激酶線粒體抗體
醛固酮類還原酶家族7成員A2抗體
Kelch樣蛋白6抗體
細(xì)胞角蛋白2e抗體
α1酸性糖蛋白1/類粘蛋白1重組鼠單克隆抗體
辣根過氧化物酶標(biāo)記的白細(xì)胞介素13受體a2抗體
小鼠乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)家族蛋白9抗體
操作方法:
組織塊直接培養(yǎng)法(原代細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn))
材料與儀器
【動(dòng)物】選擇大約一半足孕時(shí)間的胚胎,10-13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細(xì)胞,,成纖維細(xì)胞可從這些細(xì)胞衍生獲得,。每組小鼠胚胎1個(gè)【實(shí)驗(yàn)材料】每組的超凈臺(tái)中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml 0.25%瓶,;PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個(gè),;3、50ml離心筒2個(gè)4,、滅菌培養(yǎng)皿1個(gè),,細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè)5、1ml,,200μl移液器各1支,;槍頭盒2個(gè);無菌玻璃攪拌棒1個(gè)6,、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊,;7、滅好菌的鑷子1把,,剪刀1把,;8、酒精燈1臺(tái),;
步驟
1) 胚胎的分離,。適用哺乳動(dòng)物(倉鼠、小鼠和大鼠)2)將1-2個(gè)胚胎轉(zhuǎn)移至一個(gè)小的無菌培養(yǎng)皿中,,用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎,,用PBS漂洗。3)在無菌狀態(tài)下,,將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25%的無菌,用攪拌棒輕輕攪動(dòng),。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動(dòng)15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,,將含有懸浮細(xì)胞的液體轉(zhuǎn)移至一無菌50ml的離心管中,,該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中,,重復(fù)步驟4和5,。7)離心混合的細(xì)胞懸液,1200r/rain,,5分鐘,,棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細(xì)胞,,按步驟7再次離心,。9)用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞直至上清清亮為止。
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