目錄:上海一研生物科技有限公司>>原代細(xì)胞>>小鼠原代細(xì)胞>> 小鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞
參考價(jià) | ¥2600-¥6000 | /件 |
參考價(jià):¥2600 ~ ¥6000
更新時(shí)間:2024-12-07 07:32:06瀏覽次數(shù):396評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
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貨號(hào) | EY-XY3712 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | 組織來(lái)源 | 淋巴管 |
種屬來(lái)源 | 小鼠 |
產(chǎn)品名稱 | 小鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞 | 貨號(hào) | EY-XY3712 |
英文名稱 | Lymphatic Endothelial Cells | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質(zhì)量檢測(cè):vEGFR-3免疫熒光染色為陽(yáng)性,,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基:小鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳,;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右
運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
小鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞采用消化法結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),,小鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞分離自淋巴管組織;淋巴管由毛細(xì)淋巴管匯合而成,。其形態(tài)結(jié)構(gòu)與靜脈相似,,但管徑較細(xì),管壁較薄,,瓣膜較多且發(fā)達(dá),,外形呈串珠狀。淋巴管根據(jù)其位置分為淺,、深二種,。它們管位于皮下,常與淺靜脈伴行,,收集皮膚和皮下組織的淋巴,。深淋巴管與深部血管伴行,收集肌肉和內(nèi)臟的淋巴,。淺,、深淋巴管之間有廣泛的交通支。淋巴管在向心行程中,,通常經(jīng)過(guò)一個(gè)或多個(gè)淋巴結(jié),,從而把淋巴細(xì)胞帶入淋巴液。主要功能是濾過(guò)淋巴液,,產(chǎn)生淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞,,參與機(jī)體的免疫反應(yīng)。 |
收貨處理取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,,拆下封口膜,,放入37℃,、5%CO2,,飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)
傳代密度細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿,。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min,;倒置顯微鏡下觀察,,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,;
3.用吸管輕輕吹打混勻,,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,,置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),;
4.待細(xì)胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基,。
1.準(zhǔn)備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面,,紫外線消毒20分鐘。開(kāi)始工作前先洗手,、75%酒精擦拭手至肘部,。
2.布局:點(diǎn)燃酒精燈,安裝吸管帽,。
3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污,;如懷疑組織可能污染,,可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。
4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,以便于消化,。加入比組織塊總量多30~50倍的液,,然后一并倒入三角燒瓶中,結(jié)扎瓶口或塞以膠塞,。
5.消化:或用恒溫水浴,,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次,,如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨?。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6.分離:在消化過(guò)程中見(jiàn)消化液發(fā)混濁時(shí),,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,,如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞,立即終止消化,,隨即通過(guò)適宜不銹鋼篩,,濾掉尚未充分消化開(kāi)的組織塊。低速(500~1000轉(zhuǎn)/分)離心消化液5分鐘,,吸出上清,,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7.計(jì)數(shù):用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),,如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過(guò)大,,再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后,分裝入培養(yǎng)瓶中,。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō),,pH要求在7.2~7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,,如顏色偏黃,,說(shuō)明液體變酸,可用NaHCO3調(diào)整,。
8.培養(yǎng):置于36.5℃溫箱培養(yǎng),,如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶蓋需擰松半圈,。
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