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參考價 | ¥2600-¥6000 | /件 |
參考價:¥2600 ~ ¥6000
更新時間:2024-12-06 21:37:40瀏覽次數(shù):315評價
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
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貨號 | EY-XY3685 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細胞形態(tài) | 長梭狀/不規(guī)則 | 英文名稱 | Osteoblast Cells |
種屬來源 | 小鼠 |
產(chǎn)品名稱 | 小鼠成骨細胞 | 貨號 | EY-XY3685 |
英文名稱 | Osteoblast Cells | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質(zhì)量檢測:堿性磷酸酶(ALP)化學染色,,純度高于 90%,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基:小鼠成骨細胞培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳,;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,,1周左右
運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
小鼠成骨細胞采用先用短時間消化,、后用膠原酶反復(fù)消化制備而來,,小鼠成骨細胞分離自顱骨組織;顱骨位于脊柱上方,,由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成,。除下頜骨及舌骨外,其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結(jié),,起著保護和支持腦,、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分,。腦顱位于顱的后上部,,內(nèi)有顱腔,容納腦,,共8塊,。面顱為顱的前下部分,包含眶,、鼻腔,、口腔等結(jié)構(gòu),,構(gòu)成面部的支架,,共15塊。成骨細胞是骨形成的主要功能細胞,,負責骨基質(zhì)的合成,、分泌和礦化。骨不斷地進行著重建,,骨重建過程包括破骨細胞貼附 |
收貨處理取出T25細胞培養(yǎng)瓶,,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,,放入37℃,、5%CO2,飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)
傳代密度細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例傳代建議1:2傳代,,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿,。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min,;倒置顯微鏡下觀察,,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化,;
3.用吸管輕輕吹打混勻,,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,,置于37℃,、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),;
4.待細胞貼壁后,,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基,。
1.準備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面,,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手,、75%酒精擦拭手至肘部,。
2.布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽,。
3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污,;如懷疑組織可能污染,,可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。
4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,,以便于消化,。加入比組織塊總量多30~50倍的液,然后一并倒入三角燒瓶中,,結(jié)扎瓶口或塞以膠塞,。
5.消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,,消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次,,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定,。
6.分離:在消化過程中見消化液發(fā)混濁時,,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,,如組織已分散成細胞團或單個細胞,立即終止消化,,隨即通過適宜不銹鋼篩,,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500~1000轉(zhuǎn)/分)離心消化液5分鐘,,吸出上清,,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7.計數(shù):用計數(shù)板計數(shù),,如細胞懸液細胞密度過大,,再補加培養(yǎng)液調(diào)整后,分裝入培養(yǎng)瓶中,。對大多數(shù)細胞來說,,pH要求在7.2~7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,,如顏色偏黃,,說明液體變酸,可用NaHCO3調(diào)整,。
8.培養(yǎng):置于36.5℃溫箱培養(yǎng),,如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶蓋需擰松半圈,。
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