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參考價：￥2600 ~ ￥6000
更新時間：2024-12-06 10:48:28瀏覽次數：351評價
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| 供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | EY-XY3358 | 應用領域 | 生物產業(yè) |
| 主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 生長特性 | 貼壁生長 |
| 細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 英文名稱 | Human retinal pigment epithelial cells |
| 種屬來源 | 人 |
人視網膜色素上皮細胞
細胞基本屬性：
產品名稱 | 人視網膜色素上皮細胞 | 組織來源 | 視網膜 |
種屬 | 人 | 生長特性 | 貼壁生長 |
形態(tài)特征 | 上皮細胞樣 | 英文名稱 | Human retinal pigment epithelial cells |
貨號 | EY-XY3358 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質量檢測：細胞角蛋白-8(CK-8)免疫熒光染色為陽性，純度高于 90%，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等
產品規(guī)格：5x105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基：人視網膜色素上皮細胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
換液頻率：每2-3天換液一次
消化液：0.25%
產品貨期現貨,，1周左右
運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞（包郵）
供應限制僅限于科學研究,，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用
背景介紹：
人視網膜色素上皮細胞采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，人視網膜色素上皮細胞分離自視網膜組織,；視網膜居于眼球壁的內層，是一層透明的薄膜,。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開,，稱為視網膜脫離,。色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成,，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞,、遮光、散熱以及再生和修復等作用,。組織學上視網膜分為10層,，由外向內分別為：色素上皮層、視錐,、視桿細胞層,、外界膜、外顆粒層,、外叢狀層,、內顆粒層、內叢狀層,、神經節(jié)細胞層 |
原代細胞的分離培養(yǎng)：
原代培養(yǎng)即直接從有機體取下細胞,、組織或器官，讓它們在體外維持與生長,。原代培養(yǎng)的特點是細胞或組織剛離開機體,，它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變，在一定程度上可反映它們在體內的狀態(tài),，表現出來源組織或細胞的特性,， 因此用于藥物實驗，尤其是藥物對細胞活動、結構,、代謝,、有無毒性或殺傷作用等，是的工具,。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法,。
（一）組織塊培養(yǎng)法
許多實驗室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進行原代培養(yǎng)，因為方法簡單,，細胞也較容易生長,。尤其是培養(yǎng)心肌，有時還可觀察到心肌組織塊搏動,。細胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后,， 即可進行傳代。
1. 設備材料
培養(yǎng)箱,、冰箱,、超凈工作臺／無菌間、無菌吸管,、離心管,、酒精燈、試管架,、培養(yǎng)瓶,、培養(yǎng)皿、消化液,、基礎培養(yǎng)液,、胎牛血清、Hanks 溶液,、雙抗試液,、剪刀、攝子,、小燒杯,。
2. 操作步驟
（1） 在無菌條件下，取待培養(yǎng)的組織適量,，置入小燒杯中,， 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次，去掉組織塊表面的血污,。
（2）用眼科剪將組織塊反復剪成0.5~ 1mm3的小塊,。
（3）再用Hanks 溶液反復漂洗， 直至液體不混濁為止,。等組織塊下沉,，將燒杯傾斜,，用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。
（4）用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml,、200μg/ml）的培養(yǎng)液再清洗,，用吸管吸干后加入5ml 含20％血清的培養(yǎng)液。
（5）用彎頭吸管吸取組織小塊,，均勻地置于培養(yǎng)皿內表面,，吸去多余的培養(yǎng)液，各組織小塊之間相距0.5cm 為宜,。蓋好培養(yǎng)皿蓋,，做好標記， 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內,。
（6） 2~4h 后,，于超凈工作臺中，緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20％血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml ）的培養(yǎng)液少量,，以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中,。
（7）輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱， 如無特殊情況,，不必觀察,。1~2 周后，可觀察到細胞從組織塊邊緣長出,，形成生長暈。
（9） 一般說來,，若培養(yǎng)液無明顯改變,， 1 周換液1 次即可。待細胞長滿整個培養(yǎng)皿內表面,，即可進行傳代培養(yǎng),。
操作方法：
組織塊直接培養(yǎng)法（原代細胞培養(yǎng)實驗）
材料與儀器
【動物】選擇大約一半足孕時間的胚胎，10－13天齡胚胎含有最大數量的未分化的間質細胞,，成纖維細胞可從這些細胞衍生獲得,。每組小鼠胚胎1個【實驗材料】每組的超凈臺中有以下物品：1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS)1瓶,；100ml 0.25%瓶,；PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個；3,、50ml離心筒2個4,、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個5,、1ml,，200μl移液器各1支,；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個6,、細胞計數板1塊,；7、滅好菌的鑷子1把,，剪刀1把,；8、酒精燈1臺,；
步驟
1) 胚胎的分離,。適用哺乳動物(倉鼠、小鼠和大鼠)2)將1－2個胚胎轉移至一個小的無菌培養(yǎng)皿中,，用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎,，用PBS漂洗。3)在無菌狀態(tài)下,，將絞碎的胚胎轉移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25％的無菌,用攪拌棒輕輕攪動,。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,，將含有懸浮細胞的液體轉移至一無菌50ml的離心管中,，該管內按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中,，重復步驟4和5,。7)離心混合的細胞懸液，1200r/rain,，5分鐘,，棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細胞,，按步驟7再次離心,。9)用PBS反復洗滌細胞直至上清清亮為止。
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