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參考價 | ¥2600-¥6000 | /件 |
參考價:¥2600 ~ ¥6000
更新時間:2024-12-06 07:59:15瀏覽次數:283評價
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供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
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貨號 | EY-XY3271 | 應用領域 | 生物產業(yè) |
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 組織來源 | 氣管 |
種屬來源 | 人 |
人氣管平滑肌細胞
細胞基本屬性:
產品名稱 | 人氣管平滑肌細胞 | 組織來源 | 氣管 |
種屬 | 人 | 生長特性 | 貼壁生長 |
形態(tài)特征 | 成纖維細胞樣 | 英文名稱 | Tracheal Smooth Muscle Cells |
貨號 | EY-XY3271 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質量檢測:平滑肌肌動蛋白(α-SMA)免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV,、支原體,、細菌,、酵母和真菌等
產品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基:人氣管平滑肌細胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳,;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%
產品貨期現貨,,1周左右
運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用
背景介紹:
人氣管平滑肌細胞采用-膠原酶聯合消化法結合組織貼塊法制備而來,,人氣管平滑肌細胞分離自氣管組織,;氣管(Trachea),呼吸器官的一部分,;為后壁略平的圓筒型管狀,。上端平第六頸椎下緣,與環(huán)狀軟骨相連,;向下至第四,、五胸椎體(相當胸骨角平面)交界處,分左,、右主支氣管,,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環(huán)狀軟骨構成,,有彈性,,軟骨為“C"字形的軟骨環(huán),缺口向后,,各軟骨環(huán)以韌帶連接起來,,環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結締組織連接,保持了持續(xù)張開狀態(tài),。 |
原代細胞的分離培養(yǎng):
原代培養(yǎng)即直接從有機體取下細胞,、組織或器官,讓它們在體外維持與生長,。原代培養(yǎng)的特點是細胞或組織剛離開機體,,它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變,在一定程度上可反映它們在體內的狀態(tài),,表現出來源組織或細胞的特性,, 因此用于藥物實驗,尤其是藥物對細胞活動,、結構,、代謝,、有無毒性或殺傷作用等,,是的工具,。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。
(一)組織塊培養(yǎng)法
許多實驗室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進行原代培養(yǎng),,因為方法簡單,,細胞也較容易生長。尤其是培養(yǎng)心肌,,有時還可觀察到心肌組織塊搏動,。細胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后, 即可進行傳代,。
1. 設備材料
培養(yǎng)箱,、冰箱、超凈工作臺/無菌間,、無菌吸管,、離心管、酒精燈,、試管架,、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿,、消化液,、基礎培養(yǎng)液、胎牛血清,、Hanks 溶液,、雙抗試液、剪刀,、攝子,、小燒杯。
2. 操作步驟
(1) 在無菌條件下,,取待培養(yǎng)的組織適量,,置入小燒杯中, 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次,,去掉組織塊表面的血污,。
(2)用眼科剪將組織塊反復剪成0.5~ 1mm3的小塊。
(3)再用Hanks 溶液反復漂洗,, 直至液體不混濁為止,。等組織塊下沉,將燒杯傾斜,,用小吸管盡量吸除Hanks 溶液,。
(4)用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培養(yǎng)液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培養(yǎng)液,。
(5)用彎頭吸管吸取組織小塊,,均勻地置于培養(yǎng)皿內表面,吸去多余的培養(yǎng)液,,各組織小塊之間相距0.5cm 為宜,。蓋好培養(yǎng)皿蓋,做好標記,, 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內,。
(6) 2~4h 后,于超凈工作臺中,,緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20%血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培養(yǎng)液少量,,以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中。
(7)輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱,, 如無特殊情況,,不必觀察。1~2 周后,,可觀察到細胞從組織塊邊緣長出,,形成生長暈。
(9) 一般說來,,若培養(yǎng)液無明顯改變,, 1 周換液1 次即可。待細胞長滿整個培養(yǎng)皿內表面,,即可進行傳代培養(yǎng),。
操作方法:
組織塊直接培養(yǎng)法(原代細胞培養(yǎng)實驗)
材料與儀器
【動物】選擇大約一半足孕時間的胚胎,10-13天齡胚胎含有最大數量的未分化的間質細胞,,成纖維細胞可從這些細胞衍生獲得,。每組小鼠胚胎1個【實驗材料】每組的超凈臺中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶,;100ml 0.25%瓶,;PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個;3,、50ml離心筒2個4,、滅菌培養(yǎng)皿1個,細胞培養(yǎng)瓶1個5,、1ml,,200μl移液器各1支;槍頭盒2個,;無菌玻璃攪拌棒1個6,、細胞計數板1塊,;7、滅好菌的鑷子1把,,剪刀1把,;8、酒精燈1臺,;
步驟
1) 胚胎的分離,。適用哺乳動物(倉鼠,、小鼠和大鼠)2)將1-2個胚胎轉移至一個小的無菌培養(yǎng)皿中,,用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎,用PBS漂洗,。3)在無菌狀態(tài)下,,將絞碎的胚胎轉移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25%的無菌,用攪拌棒輕輕攪動。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動15分鐘,。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,,將含有懸浮細胞的液體轉移至一無菌50ml的離心管中,該管內按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中,,重復步驟4和5。7)離心混合的細胞懸液,,1200r/rain,,5分鐘,棄上清,。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細胞,,按步驟7再次離心。9)用PBS反復洗滌細胞直至上清清亮為止,。
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