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人外周血單個核細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

質(zhì)量檢測：PBMC是混合體系,，故無法進(jìn)行純度鑒定,，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等

產(chǎn)品規(guī)格：5x105cells/T25或1mL凍存管

培養(yǎng)基：人外周血單個核細(xì)胞專用培養(yǎng)基

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳,；溫度：37℃

換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：0.25%

 產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨，1周左右

運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞（包郵）

供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用

背景介紹：

原代細(xì)胞的分離培養(yǎng)：

原代培養(yǎng)即直接從有機(jī)體取下細(xì)胞、組織或器官,，讓它們在體外維持與生長,。原代培養(yǎng)的特點(diǎn)是細(xì)胞或組織剛離開機(jī)體，它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變,，在一定程度上可反映它們在體內(nèi)的狀態(tài),，表現(xiàn)出來源組織或細(xì)胞的特性， 因此用于藥物實(shí)驗(yàn),，尤其是藥物對細(xì)胞活動,、結(jié)構(gòu)、代謝,、有無毒性或殺傷作用等,，是的工具。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法,。

（一）組織塊培養(yǎng)法

許多實(shí)驗(yàn)室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進(jìn)行原代培養(yǎng),，因?yàn)榉椒ê唵危?xì)胞也較容易生長,。尤其是培養(yǎng)心肌,，有時還可觀察到心肌組織塊搏動。細(xì)胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后,， 即可進(jìn)行傳代。

1. 設(shè)備材料

培養(yǎng)箱,、冰箱,、超凈工作臺／無菌間、無菌吸管,、離心管,、酒精燈,、試管架、培養(yǎng)瓶,、培養(yǎng)皿,、消化液、基礎(chǔ)培養(yǎng)液,、胎牛血清,、Hanks 溶液、雙抗試液,、剪刀,、攝子、小燒杯,。

2. 操作步驟

（1） 在無菌條件下,，取待培養(yǎng)的組織適量，置入小燒杯中,， 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次,，去掉組織塊表面的血污。

（2）用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊,。

（3）再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗,， 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉,，將燒杯傾斜,，用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。

（4）用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml,、200μg/ml）的培養(yǎng)液再清洗,，用吸管吸干后加入5ml 含20％血清的培養(yǎng)液。

（5）用彎頭吸管吸取組織小塊,，均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面,，吸去多余的培養(yǎng)液，各組織小塊之間相距0.5cm 為宜,。蓋好培養(yǎng)皿蓋,，做好標(biāo)記， 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi),。

（6） 2~4h 后,，于超凈工作臺中，緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20％血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml ）的培養(yǎng)液少量,，以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中,。

（7）輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱， 如無特殊情況,，不必觀察,。1~2 周后,，可觀察到細(xì)胞從組織塊邊緣長出，形成生長暈,。

（9） 一般說來,，若培養(yǎng)液無明顯改變， 1 周換液1 次即可,。待細(xì)胞長滿整個培養(yǎng)皿內(nèi)表面,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

操作方法：

組織塊直接培養(yǎng)法（原代細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)）

材料與儀器

【動物】選擇大約一半足孕時間的胚胎,，10－13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細(xì)胞,，成纖維細(xì)胞可從這些細(xì)胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個【實(shí)驗(yàn)材料】每組的超凈臺中有以下物品：1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶,；8ml小牛血清（FCS)1瓶,；100ml 0.25%瓶；PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個,；3、50ml離心筒2個4,、滅菌培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個5,、1ml，200μl移液器各1支,；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個6,、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊,；7,、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把,；8、酒精燈1臺,；

步驟

1) 胚胎的分離。適用哺乳動物(倉鼠,、小鼠和大鼠)2)將1－2個胚胎轉(zhuǎn)移至一個小的無菌培養(yǎng)皿中,，用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎,，用PBS漂洗,。3)在無菌狀態(tài)下，將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25％的無菌,用攪拌棒輕輕攪動,。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動15分鐘,。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,，將含有懸浮細(xì)胞的液體轉(zhuǎn)移至一無菌50ml的離心管中,，該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中，重復(fù)步驟4和5,。7)離心混合的細(xì)胞懸液,，1200r/rain,，5分鐘,，棄上清,。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細(xì)胞，按步驟7再次離心。9)用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞直至上清清亮為止,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

氧化還原酶GlyR1/核蛋白60抗體

Ratcholesterol,CHELISAKit大鼠(CH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

細(xì)胞硬脂酰去飽和酶(STEAROYLCOADESATURASE)活性薄層色譜(TLC)同位素法定量檢測試劑盒20次

大鼠半胱酸抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒 ，英文名： Cys-C ELISA Kit

Mouse beta mannosidase (beta Manase) ELISA Kit 小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠Fractalkine(mouse Fractalkine) 48T/96T 進(jìn)口分裝

ELISAKitAQP-5小鼠水通道蛋白5規(guī)格：48T/96T

Humanbasicfibroblastgrowthfactor6,bFGF-6ELISAKit人堿性成纖維細(xì)胞生長因子6(bFGF-6)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

人輕鏈kappa抗體(κ-IgLC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

小鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒 Mouse myelin basic protein,MBP ELISA Kit

鵝特定基因序列(Goose)檢測試劑盒 48T

CLIAKitforHumanBetaai-galactanproteinsIgGELISAKit人β乳糖蛋白抗體IgG規(guī)格：48T/96T

細(xì)胞EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒20次

ELISAKitHIF-1α大鼠低氧誘導(dǎo)因子1α規(guī)格：48T/96T

大鼠血管內(nèi)皮生長因子受體1(VEGFR1)ELISA試劑盒 ,，英文名： VEGFR1 ELISA Kit

Mouse chemokine (FK) ELISA Kit 小鼠趨化因子(FK)ELISA試劑盒

周期素F抗體

含SH2結(jié)構(gòu)域蛋白D4B抗體蛋白抗體

三磷酸鳥苷環(huán)水解酶抗體

NDUFAF1蛋白抗體

線粒體內(nèi)膜轉(zhuǎn)位同源蛋白22抗體

伴肌動蛋白抗體

磷酸化雌激素反應(yīng)指狀蛋白抗體

人外周血單個核細(xì)胞Cullin2抗體