目錄:上海一研生物科技有限公司>>原代細胞>>人原代細胞>> 人椎間盤髓核細胞
參考價 | ¥2600-¥6000 | /瓶 |
參考價:¥2600 ~ ¥6000
更新時間:2024-12-05 11:09:16瀏覽次數(shù):749評價
聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
---|---|---|---|
貨號 | EY-XY3211 | 主要用途 | 僅供科研研究實驗 |
種屬來源 | 人 | 生長特性 | 貼壁生長 |
形態(tài)特征 | 梭形,、多角形細胞樣 | 組織來源 | 椎間盤組織 |
人椎間盤髓核細胞
細胞基本屬性:
規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 | 形態(tài) | 梭形,、多角形細胞樣,貼壁生長 |
貨號 | EY-XY3211 | 種屬來源 | 人 |
組織來源 | 椎間盤組織 | 生長特性 | 貼壁生長 |
形態(tài)特征 | 梭形,、多角形細胞樣 | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
培養(yǎng)基:人椎間盤髓核細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)環(huán)境:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
傳代特征:可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
細胞名稱
質(zhì)量檢測人椎間盤髓核細胞經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基人椎間盤髓核細胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件氣相:95%空氣+5%二氧化碳,;溫度:37℃
消化液0.25%
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,,1周左右
運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹:
人椎間盤髓核細胞采用膠原酶-混合消化法并結(jié)合軟骨細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,。人椎間盤髓核細胞分離椎間盤組織,;椎間盤是位于脊柱兩椎體之間,分為中央部的髓核,,富于彈性的膠狀物質(zhì),;周圍部的纖維環(huán),由多層纖維軟骨環(huán)按同心圓排列,。上下有軟骨板,,是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上,下面骺環(huán)中間的骨面,。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來,。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成,位于髓核的四周,。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊,,使纖維環(huán)成為堅實的組織,能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負荷,。髓核,,是乳白色半透明膠狀體,富于彈性,,為椎間盤結(jié)構(gòu)的一部分,,位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì),。嬰幼兒時期的髓核含水量為80%-90%,,即使到了老年,其含水量也在70%上下,。髓核在出生時體積大而松散,,位于椎間盤的中央,至成年時位置移至椎間盤的中后部,;在成年以前構(gòu)成髓核的主要物質(zhì)是大量蛋白多糖復(fù)合體,、膠原纖維和纖維軟骨,隨著年齡的增長,,髓核中的蛋白多糖解聚增多,,水分逐漸減少,膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代,。 |
原代細胞的分離培養(yǎng):
原代培養(yǎng)即直接從有機體取下細胞,、組織或器官,讓它們在體外維持與生長,。原代培養(yǎng)的特點是細胞或組織剛離開機體,,它們的生物性狀尚未發(fā)生很大的改變,,在一定程度上可反映它們在體內(nèi)的狀態(tài),表現(xiàn)出來源組織或細胞的特性,, 因此用于藥物實驗,,尤其是藥物對細胞活動、結(jié)構(gòu),、代謝,、有無毒性或殺傷作用等,是的工具,。常用的原代培養(yǎng)法有組織塊培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法,。
(一)組織塊培養(yǎng)法
許多實驗室喜歡用組織塊培養(yǎng)法進行原代培養(yǎng),因為方法簡單,,細胞也較容易生長,。尤其是培養(yǎng)心肌,有時還可觀察到心肌組織塊搏動,。細胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶后,, 即可進行傳代。
1. 設(shè)備材料
培養(yǎng)箱,、冰箱,、超凈工作臺/無菌間、無菌吸管,、離心管,、酒精燈、試管架,、培養(yǎng)瓶,、培養(yǎng)皿、消化液,、基礎(chǔ)培養(yǎng)液、胎牛血清,、Hanks 溶液,、雙抗試液、剪刀,、攝子,、小燒杯。
2. 操作步驟
(1) 在無菌條件下,,取待培養(yǎng)的組織適量,,置入小燒杯中, 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次,,去掉組織塊表面的血污,。
(2)用眼科剪將組織塊反復(fù)剪成0.5~ 1mm3的小塊,。
(3)再用Hanks 溶液反復(fù)漂洗, 直至液體不混濁為止,。等組織塊下沉,,將燒杯傾斜,用小吸管盡量吸除Hanks 溶液,。
(4)用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml,、200μg/ml)的培養(yǎng)液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培養(yǎng)液,。
(5)用彎頭吸管吸取組織小塊,,均勻地置于培養(yǎng)皿內(nèi)表面,吸去多余的培養(yǎng)液,,各組織小塊之間相距0.5cm 為宜,。蓋好培養(yǎng)皿蓋,做好標記,, 置37°C 的CO2培養(yǎng)箱內(nèi),。
(6) 2~4h 后,于超凈工作臺中,,緩緩地向培養(yǎng)皿中加入上述含20%血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培養(yǎng)液少量,,以使組織塊浸沒在培養(yǎng)液中。
(7)輕輕地將培養(yǎng)皿及組織塊移至CO2 培養(yǎng)箱,, 如無特殊情況,,不必觀察。1~2 周后,,可觀察到細胞從組織塊邊緣長出,,形成生長暈。
(9) 一般說來,,若培養(yǎng)液無明顯改變,, 1 周換液1 次即可。待細胞長滿整個培養(yǎng)皿內(nèi)表面,,即可進行傳代培養(yǎng),。
操作方法:
組織塊直接培養(yǎng)法(原代細胞培養(yǎng)實驗)
材料與儀器
【動物】選擇大約一半足孕時間的胚胎,10-13天齡胚胎含有最大數(shù)量的未分化的間質(zhì)細胞,,成纖維細胞可從這些細胞衍生獲得,。每組小鼠胚胎1個【實驗材料】每組的超凈臺中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶,;100ml 0.25%瓶,;PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個;3、50ml離心筒2個4,、滅菌培養(yǎng)皿1個,,細胞培養(yǎng)瓶1個5、1ml,,200μl移液器各1支,;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個6,、細胞計數(shù)板1塊,;7、滅好菌的鑷子1把,,剪刀1把,;8、酒精燈1臺,;
步驟
1) 胚胎的分離,。適用哺乳動物(倉鼠、小鼠和大鼠)2)將1-2個胚胎轉(zhuǎn)移至一個小的無菌培養(yǎng)皿中,,用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎,,用PBS漂洗。3)在無菌狀態(tài)下,,將絞碎的胚胎轉(zhuǎn)移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25%的無菌,用攪拌棒輕輕攪動,。4)在溫暖的環(huán)境中或置于37°C培養(yǎng)箱中輕輕搖動15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降,,將含有懸浮細胞的液體轉(zhuǎn)移至一無菌50ml的離心管中,,該管內(nèi)按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中,,重復(fù)步驟4和5,。7)離心混合的細胞懸液,1200r/rain,,5分鐘,,棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細胞,,按步驟7再次離心,。9)用PBS反復(fù)洗滌細胞直至上清清亮為止。
公司正在出售的產(chǎn)品:
楊氏檸檬酸桿菌 | 人惡性黑色素瘤細胞 |
志賀氏菌屬 | 人黑色素瘤細胞 |
弗氏耶爾森菌 | 人皮膚T淋巴瘤細胞 |
丙酸桿菌 | 人急性淋巴白血病細胞 |
梅氏弧菌 | 人黑色瘤細胞系 |
有毒威克斯菌 | 人肝腹水腺癌細胞 |
莫拉氏菌屬 | 人卵巢腺癌細胞 |
霍利斯格里蒙菌 | 人子宮內(nèi)膜腺癌細胞 |
嗜溫鞘氨醇桿菌 | 人急性單核細胞白血病細胞 |
植物乳球菌 | 人神經(jīng)膠質(zhì)細胞瘤細胞 |
美人魚發(fā)光桿菌美人魚亞種 | 人皮膚鱗癌細胞 |
耳炎差異球菌 | 人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞 |
弗氏檸檬酸桿菌 | 急性髓系細胞白血病細胞 |
殺鮭氣單胞菌日本鮭亞種 | 人子宮頸鱗狀細胞癌細胞 |
Bacillus megaterium | 人腎透明細胞腺癌細胞 |
Luteimonas composti | 人腎腺癌細胞 |
Bacillus firmus | 人Burkitt淋巴瘤細胞 |
Acidovorax soli | 人急性淋巴母細胞性白血病細胞 |
Chryseobacterium ureilyticum | 人膀胱移行細胞癌細胞 |
Luteimonas marina | 人胎盤絨膜癌細胞 |
Arthrobacter tecti | 人涎腺癌細胞 |
Bacillus niacini | COC1細胞耐藥亞株 |
Arthrobacter niigatensis | Hela細胞耐藥亞株 |
Bacillus cereus | 人T淋巴瘤細胞 |
Pseudomonas otitidis | 人涎腺腺樣囊性癌細胞 |
Streptomyces thermocarboxydus | 人小腸癌細胞 |
Bacillus magaterium | 人急性早幼粒白血病細胞 |
Bacillus marisflavi | 人椎間盤髓核細胞人喉癌上皮細胞 |
Cellulosimicrobium funkei | 人膀胱移行細胞癌 |
Bacillus flexus | 人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤 |
Bacillus subtilis | 人腎細胞腺癌細胞 |