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商品屬性：

背景：

血管內(nèi)皮生長因子 165（VEGF165）是一種強(qiáng)效的生長和血管生成細(xì)胞因子，屬于 VEGF 家族,，包括 VEGF-A、VEGF-B,、VEGF-C,、VEGF-D、VEGF-E 和 PIGF,。VEGF165 是一種豐富的糖基化細(xì)胞因子,，由兩條相同的 165 個(gè)氨基酸鏈組成。VEGF165 在胚胎血管生成,、血管生成和神經(jīng)發(fā)生中發(fā)揮著重要作用,。

標(biāo)記：

1.將細(xì)胞培養(yǎng)基與EdU溶液按照500：1的比例混合，制成2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基,。

2.提前將2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,，然后將150微升2×EdU標(biāo)記培養(yǎng)基與等體積細(xì)胞培養(yǎng)基混合，獲得1×EdU溶液,。

【注】：①不建議替換全部培養(yǎng)基,，這樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度。②配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,，用量以沒過細(xì)胞為宜,。

3.孵育細(xì)胞2 h，棄培養(yǎng)基,。

【注】：①培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài),。②大多數(shù)腫瘤細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2 h的孵育時(shí)間。

4.以1xPBS清洗細(xì)胞兩次，每次5 min, 以除去未摻入DNA的EdU殘留,。

【注】：對于貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度,。

實(shí)驗(yàn)步驟：

1. 將細(xì)胞以 104-105 個(gè)細(xì)胞/孔的密度接種在 96 孔板 中，加入 100μL 培養(yǎng)基,，含或不含待測化合物,。在 CO2 培養(yǎng)箱中在 37℃ 下培養(yǎng)細(xì)胞 24 小時(shí)。

2. 向板中加入 10μL 不同濃度的待測物質(zhì),。

3. 在培養(yǎng)箱中將培養(yǎng)板培養(yǎng)適當(dāng)時(shí)間（如 6,、12、24 或 48 小時(shí)）,。

4. 向板的每個(gè)孔中加入 10μL CCK-8 溶液,。小心不要將氣泡引入孔中。

5. 將平板在培養(yǎng)箱中孵育 1-4 小時(shí),。

6. 在讀板之前,，在定軌振蕩器上輕輕混勻,。

7. 使用酶標(biāo)儀測量 450nm 處的吸光度,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

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