目錄:上海一研生物科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>三羧酸循環(huán)系列>> 甲基檸檬酸合酶(MCS）生化檢測(cè)試劑盒
| 參考價(jià) | ￥300-￥5000 | /盒 |
參考價(jià)：￥300 ~ ￥5000
更新時(shí)間：2024-11-22 15:17:25瀏覽次數(shù)：1235評(píng)價(jià)
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100管/96樣 50管/48樣 25管/24樣 10管/9樣 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | EY-01S1151 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 僅用于科研 |
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
甲基檸檬酸合酶(MCS）生化檢測(cè)試劑盒 | 100管/96樣 50管/48樣 25管/24樣 10管/9樣 | EY-01S1151 |
測(cè)定意義：
MCS廣泛存在于動(dòng)物,、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體基質(zhì)中，與檸檬酸合酶（CS）共同參與三羧酸循環(huán)的調(diào)節(jié),。
測(cè)定原理：
MCS催化丙酰CoA和草酰乙酸產(chǎn)生甲基檸檬酰，進(jìn)一步水解產(chǎn)生甲基檸檬酸,；該反應(yīng)促使無(wú)色的DTNB轉(zhuǎn)變成黃色的TNB,，在 412nm處有特征吸光值。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、臺(tái)式離心機(jī),、水浴鍋、可調(diào)式移液器,、微量石英比色皿/96孔板,、研缽、冰,、無(wú)水乙醇和蒸餾水
試劑一：液體×1瓶,，室溫保存。
試劑二：液體×1瓶,，4℃保存,。
試劑三：粉劑×2瓶，－20℃保存,。臨用前加入22mL試劑二,，現(xiàn)配現(xiàn)用。
試劑四：液體×1支,，4℃保存,。
1、組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織,，加入1mL試劑一）進(jìn)行冰浴勻漿,。16000g，4℃離心20min,，取上清置冰上待測(cè),。
2、細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一）,，冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w,，超聲3秒，間隔7秒,，總時(shí)間3min）,；16000g， 4℃離心20min,，取上清液置冰上待測(cè),。
3、血清等液體：直接測(cè)定,。
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（1）按照蛋白濃度計(jì)算
活性單位定義：25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。
ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T
=1608×△÷Cpr
（2）按照樣本質(zhì)量計(jì)算
活性單位定義：25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位,。
ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T
=1608×△A÷W
（3）按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
活性單位定義：25℃中每104個(gè)細(xì)胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位,。
ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細(xì)胞數(shù)量×V樣÷V樣總)÷T
=1608×△A ÷細(xì)胞數(shù)量
（4）按液體體積計(jì)算
活性單位定義：25℃中每毫升血清每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。
ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T
=1608×△A
ε：NADH摩爾消光系數(shù),，6.22×103L/mol/cm,；d：比色皿光徑，1 cm,；V反總：反應(yīng)體系總體積,，1000μL=0.001 L；Cpr：上清液蛋白質(zhì)濃度,，mg/mL,；W：樣本質(zhì)量，g,；V樣：加入反應(yīng)體系中上清液體積,，100μL=0.1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間,，1min,。
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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