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| 參考價(jià) | ￥300-￥5000 | /盒 |
參考價(jià)：￥300 ~ ￥5000
更新時(shí)間：2024-11-22 13:21:20瀏覽次數(shù)：1033評價(jià)
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100管/48樣 50管/24樣 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | EY-01S1149 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 僅用于科研 |
商品屬性：
產(chǎn)品名稱：乳酸含量（LA）生化檢測試劑盒
規(guī)格：100管/48樣 50管/24樣
貨號(hào) : EY-01S1149
測試方法:微量法 可見分光光度法
分類：三羧酸循環(huán)系列
商品詳情：
測定意義
乳酸是生物體代謝過程中重要的中間產(chǎn)物，與糖代謝、脂類代謝,、蛋白質(zhì)代謝及細(xì)胞內(nèi)能量
代謝密切相關(guān)，乳酸含量是評估糖元代謝的和有氧代謝的重要指標(biāo),。
測定原理
乳酸在乳酸脫氫酶的作用下生成丙酮酸,，同時(shí)使NAD+還原生成 NADH 和 H
+，H
+傳遞給 PMS
生成的 PMSH2還原 INT 生成紅色物質(zhì),，在 530nm 處有特征吸收峰,。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平,、研缽、離心機(jī),、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、微量石英比色皿/96 孔板、恒溫水浴鍋,。
ADH測定操作：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零,。
2. 試劑三在25℃水浴中保溫30 min,。
3. 在1mL石英比色皿中依次加入100μL樣本上清液、800μL試劑三和100μL試劑四,，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,，分別記錄15s和75s時(shí)吸光值，分別記為A1和A2,?！鰽測定管=A1-A2。
測定步驟：
1,、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,，調(diào)節(jié)波長至340nm，蒸餾水調(diào)零,。
2,、將試劑二在37℃（哺乳動(dòng)物）或25℃（其它物種）水浴10min以上。
3,、操作表：
試劑名稱（μL） | 測定孔 |
樣本 | 20 |
試劑二 | 760 |
試劑三 | 10 |
試劑四 | 10 |
將上述試劑按順序加入1 mL石英比色皿中,，混勻后立即在340 nm波長下記錄初始吸光度A1和反應(yīng)1min后的吸光度A2，計(jì)算ΔA=A1-A2,。
注意：若A1-A2大于0.5,，需將樣本用提取液稀釋，使A1-A2小于0.5,，可提高檢測靈敏度,。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
NAD-MDH活力單位的計(jì)算：
1,、血清（漿）NAD-MDH活力的計(jì)算
單位的定義：每毫升血清（漿）每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位,。
NAD-MDH（nmol/min/mL）=[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=6430×ΔA
2、組織,、細(xì)菌或細(xì)胞中NAD-MDH活力的計(jì)算:
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位,。
NAD-MDH（nmol/min/mg prot）=[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=6430×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計(jì)算：
單位的定義：每g組織每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位。
NAD-MDH（nmol/min/g 鮮重）=[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷（W× V樣÷V樣總）÷T =6430×ΔA÷W
（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：
單位的定義：每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位,。
NAD-MDH（nmol/min/104 cell）=[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷（2000×V樣÷V樣總）÷T=3.215×ΔA
V反總：反應(yīng)體系總體積，8×10-4 L；ε：NADH摩爾消光系數(shù),，6.22×103 L / mol /cm,；d：比色皿光徑，1cm,；V樣：加入樣本體積,，0.02mL；V樣總：加入提取液體積,，1 mL,；T：反應(yīng)時(shí)間，1 min,；W：樣本質(zhì)量,，g；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/mL,；2000：細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù)，2000萬,。
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