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| 參考價 | ￥300-￥5000 | /盒 |
參考價：￥300 ~ ￥5000
更新時間：2024-11-22 11:00:46瀏覽次數：1003評價
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| 供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 100管/96樣 50管/48樣 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | EY-01S144 | 應用領域 | 生物產業(yè) |
| 主要用途 | 僅用于科研 |
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
脫氫抗壞血酸還原酶（DHAR）生化檢測試劑盒 | 100管/96樣 50管/48樣 | EY-01S144 |
測定意義：
DHAR存在于細胞質,、線粒體和葉綠體中。DHAR催化GSH還原DHA生成AsA和GSSG,，調控細胞AsA/DHA比值,，是抗壞血酸-氧化還原循環(huán)的關鍵酶。提高植物體內的 DHAR 活性,，可提高植物食品中AsA含量,，進而提高植物食品的營養(yǎng)品質。
測定原理：
DHAR催化GSH還原DHA生成AsA,，通過測定DHA減少速率,，計算DHAR活性。
實驗中所需儀器及設備：
研缽,、冰,、低溫離心機,、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板,、可調式移液器和蒸餾水,。
試劑一：液體×1瓶，室溫保存,。
試劑二：液體×1瓶,，4℃保存。
試劑三：粉劑×2瓶,，－20℃保存,。臨用前加入22mL試劑二，現配現用,。
試劑四：液體×1支,，4℃保存。
1,、組織：按照組織質量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織,，加入1mL試劑一）進行冰浴勻漿。16000g,，4℃離心20min,，取上清置冰上待測。
2,、細菌,、真菌：按照細胞數量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w,，超聲3秒,，間隔7秒，總時間3min）,；16000g,， 4℃離心20min，取上清液置冰上待測,。
3,、血清等液體：直接測定。
（1）按照蛋白濃度計算
活性單位定義：25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位,。
ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T
=1608×△÷Cpr
（2）按照樣本質量計算
活性單位定義：25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位,。
ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T
=1608×△A÷W
（3）按細胞數量計算
活性單位定義：25℃中每104個細胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位。
ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細胞數量×V樣÷V樣總)÷T
=1608×△A ÷細胞數量
（4）按液體體積計算
活性單位定義：25℃中每毫升血清每分鐘氧化1nmol NADH 為1個酶活單位,。
ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T
=1608×△A
ε：NADH摩爾消光系數,，6.22×103L/mol/cm；d：比色皿光徑,，1 cm,；V反總：反應體系總體積,，1000μL=0.001 L；Cpr：上清液蛋白質濃度,，mg/mL,；W：樣本質量,，g,；V樣：加入反應體系中上清液體積，100μL=0.1 mL,；T：反應時間,，1min。
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