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參考價 | 150 |
參考價:¥ 150
100管/96樣
100管/96樣 | 150元 | 30盒可售 |
更新時間:2024-11-21 19:04:24瀏覽次數(shù):933評價
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100管/96樣 |
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貨號 | EY-01S1270 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 僅用于科研 |
商品屬性:
產(chǎn)品名稱:血清鐵濃度生化檢測試劑盒
規(guī)格:100管/96樣
貨號 : EY-01S1270
測試方法:微量法
分類:離子系列
商品詳情:
測定意義:
血清鐵是指血液中轉(zhuǎn)鐵蛋白所結(jié)合的鐵,該指標(biāo)常用于鑒別缺鐵性與非缺鐵性貧血,。
測定原理:
亞硫酸鈉還原血清Fe3+生成成Fe2+,,Fe2+進(jìn)一步與2, 2’- 聯(lián)吡啶顯色,在520nm處有吸收峰,,測定該波長光吸收值即可計算血清鐵含量,。
自備儀器和用品:
離心機(jī)、可調(diào)式移液槍,、可見分光光度計/酶標(biāo)儀,、微量石英比色皿/96孔板、冰醋酸,、氯仿和蒸餾水,。
粗酶液提取:
1,、組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。16000g,,4℃離心20min,,取上清置冰上待測。
2,、細(xì)菌,、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,,超聲3秒,,間隔7秒,總時間3min),;16000g,, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測,。
3,、血清等液體:直接測定,。
ADH測定操作:
1. 分光光度計預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,,蒸餾水調(diào)零,。
2. 試劑三在25℃水浴中保溫30 min。
3. 在1mL石英比色皿中依次加入100μL樣本上清液,、800μL試劑三和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,,分別記為A1和A2,。△A測定管=A1-A2,。
測定步驟:
1,、分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,,蒸餾水調(diào)零,。
2、將試劑二在37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴10min以上,。
3,、操作表:
試劑名稱(μL) | 測定孔 |
樣本 | 20 |
試劑二 | 760 |
試劑三 | 10 |
試劑四 | 10 |
將上述試劑按順序加入1 mL石英比色皿中,混勻后立即在340 nm波長下記錄初始吸光度A1和反應(yīng)1min后的吸光度A2,,計算ΔA=A1-A2,。
注意:若A1-A2大于0.5,需將樣本用提取液稀釋,,使A1-A2小于0.5,,可提高檢測靈敏度。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù),。
NAD-MDH活力單位的計算:
1,、血清(漿)NAD-MDH活力的計算
單位的定義:每毫升血清(漿)每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。
NAD-MDH(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=6430×ΔA
2,、組織,、細(xì)菌或細(xì)胞中NAD-MDH活力的計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位,。
NAD-MDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=6430×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算:
單位的定義:每g組織每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位,。
NAD-MDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總)÷T =6430×ΔA÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算:
單位的定義:每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。
NAD-MDH(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總)÷T=3.215×ΔA
V反總:反應(yīng)體系總體積,,8×10-4 L,;ε:NADH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm,;d:比色皿光徑,,1cm,;V樣:加入樣本體積,0.02mL,;V樣總:加入提取液體積,,1 mL;T:反應(yīng)時間,,1 min,;W:樣本質(zhì)量,g,;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,,mg/mL;2000:細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù),,2000萬,。
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