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目錄:上海一研生物科技有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>離子系列>> 血清鐵濃度生化檢測(cè)試劑盒

血清鐵濃度生化檢測(cè)試劑盒
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參考價(jià)150
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100管/96樣

屬性

供貨周期:現(xiàn)貨 規(guī)格:100管/96樣 貨號(hào):EY-01S1270 應(yīng)用領(lǐng)域:生物產(chǎn)業(yè) 主要用途:僅用于科研

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100管/96樣150元30盒可售

更新時(shí)間:2024-11-21 19:04:24瀏覽次數(shù):810評(píng)價(jià)

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/96樣
貨號(hào) EY-01S1270 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅用于科研
血清鐵濃度生化檢測(cè)試劑盒血清鐵是指血液中轉(zhuǎn)鐵蛋白所結(jié)合的鐵,,該指標(biāo)常用于鑒別缺鐵性與非缺鐵性貧血,。

商品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng):血清鐵濃度生化檢測(cè)試劑盒

規(guī)格:100/96  

貨號(hào) : EY-01S1270

測(cè)試方法:微量法   

分類(lèi):離子系列

商品詳情:

測(cè)定意義:

血清鐵是指血液中轉(zhuǎn)鐵蛋白所結(jié)合的鐵,該指標(biāo)常用于鑒別缺鐵性與非缺鐵性貧血,。

測(cè)定原理:

亞硫酸鈉還原血清Fe3+生成成Fe2+,,Fe2+進(jìn)一步與2, 2’- 聯(lián)吡啶顯色,在520nm處有吸收峰,,測(cè)定該波長(zhǎng)光吸收值即可計(jì)算血清鐵含量,。

自備儀器和用品:

離心機(jī)、可調(diào)式移液槍,、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、微量石英比色皿/96孔板,、冰醋酸、氯仿和蒸餾水,。

粗酶液提?。?br/>

1、組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,。16000g,4℃離心20min,,取上清置冰上待測(cè),。

2、細(xì)菌,、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一),,冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,,間隔7秒,,總時(shí)間3min);16000g,, 4℃離心20min,,取上清液置冰上待測(cè)。

3,、血清等液體:直接測(cè)定,。


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ADH測(cè)定操作:

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,,蒸餾水調(diào)零,。

2. 試劑三在25℃水浴中保溫30 min。

3. 在1mL石英比色皿中依次加入100μL樣本上清液,、800μL試劑三和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,,分別記為A1和A2,。△A測(cè)定管=A1-A2,。

測(cè)定步驟:

1,、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,,蒸餾水調(diào)零,。

2、將試劑二在37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)水浴10min以上,。

3,、操作表:

試劑名稱(chēng)μL

測(cè)定孔

樣本

20

試劑二

760

試劑三

10

試劑四

10


將上述試劑按順序加入1 mL石英比色皿中,,混勻后立即在340 nm波長(zhǎng)下記錄初始吸光度A1和反應(yīng)1min后的吸光度A2,計(jì)算ΔA=A1-A2,。

注意:若A1-A2大于0.5,,需將樣本用提取液稀釋?zhuān)笰1-A2小于0.5,可提高檢測(cè)靈敏度,。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù),。

NAD-MDH活力單位的計(jì)算:

1、血清(漿)NAD-MDH活力的計(jì)算

單位的定義:每毫升血清(漿)每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位,。

NAD-MDH(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=6430×ΔA

2,、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中NAD-MDH活力的計(jì)算:

(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位,。

NAD-MDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=6430×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計(jì)算:

單位的定義:每g組織每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位,。

NAD-MDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總)÷T =6430×ΔA÷W

(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:

單位的定義:每1萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個(gè)酶活力單位。

NAD-MDH(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總)÷T=3.215×ΔA

V反總:反應(yīng)體系總體積,,8×10-4 L,;ε:NADH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm,;d:比色皿光徑,,1cm;V樣:加入樣本體積,,0.02mL,;V樣總:加入提取液體積,1 mL,;T:反應(yīng)時(shí)間,1 min,;W:樣本質(zhì)量,,g;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,,mg/mL,;2000:細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù),2000萬(wàn),。

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