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青海發(fā)光桿菌組織培養(yǎng)再生

閱讀:703      發(fā)布時(shí)間:2017-11-3
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步驟一:青海發(fā)光桿菌接種
組織培養(yǎng)的接種是指將滅過菌的材料,在無菌的情況下,,切成小塊,,放入培養(yǎng)基的過程??蒲?、部門的接種工作,多在無菌室或超凈工作臺(tái)上進(jìn)行,,中學(xué)可制作接種箱,,在箱內(nèi)進(jìn)行接種。接種的方法步驟如下:
①在無菌室或接種箱中放好接種時(shí)所需要的酒精燈、貯存70%酒精和棉球的廣口瓶,、各種鑷子,、接種針、解剖刀,、手術(shù)剪,、火柴、培養(yǎng)基等,。
②在無菌室或接種箱內(nèi)用紫外燈滅菌(無菌室照射20~50分鐘,,接種箱照射15分鐘)。
③放入已滅菌的接種材料(用培養(yǎng)皿盛?。?。同時(shí),,操作人員用酒精棉球擦手,,并對接種工具用酒精燈火焰燒灼。
④用手術(shù)刀片將材料切割成若干片段,,并迅速接種入培養(yǎng)基中,。接種時(shí),錐形瓶(或試管)應(yīng)斜向火焰,,在酒精燈火焰附近操作,。
⑤材料接種好后,將錐形瓶瓶口在酒精燈火焰上轉(zhuǎn)動(dòng)燒一遍,,蓋好瓶蓋,,注明材料名稱及接種日期。
材料接種后,,應(yīng)置于26~28℃的培養(yǎng)室中進(jìn)行培養(yǎng),。
步驟二:青海發(fā)光桿菌植株誘導(dǎo)
本階段是組織培養(yǎng)中zui重要的一環(huán)。在培養(yǎng)基中植物激素的作用下,,外植體通過三條途徑迅速增殖,,這就是側(cè)芽增殖、誘導(dǎo)不定芽的形成和誘導(dǎo)胚狀體的形成,。
*    RT    5克    乙酸鈰
*    RT,,避光    1克    2-氨基聯(lián)苯
*        5克    硼氫化鈉
*    RT    5克    異丙胺
*    RT    1克    脫脂奶粉
*    2~8℃,避光    1克    肝浸粉(牛)
*    RT,,避光    25克    瓊脂粉
*    RT,,避光    100克    小牛浸膏粉
*    RT,避光    5克    三號(hào)膽鹽
*    RT    100克    豬膽鹽
*    RT,,避光    100克    酶水解干酪素
*        100克    小牛血清
青海發(fā)光桿菌

 

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