步驟一：青海發(fā)光桿菌接種
組織培養(yǎng)的接種是指將滅過菌的材料,，在無菌的情況下,，切成小塊，放入培養(yǎng)基的過程,?？蒲小⒉块T的接種工作,，多在無菌室或超凈工作臺上進(jìn)行,，中學(xué)可制作接種箱，在箱內(nèi)進(jìn)行接種,。接種的方法步驟如下：
①在無菌室或接種箱中放好接種時所需要的酒精燈,、貯存70%酒精和棉球的廣口瓶、各種鑷子,、接種針,、解剖刀、手術(shù)剪,、火柴,、培養(yǎng)基等。
②在無菌室或接種箱內(nèi)用紫外燈滅菌（無菌室照射20～50分鐘,，接種箱照射15分鐘）,。
③放入已滅菌的接種材料（用培養(yǎng)皿盛取）。同時,，操作人員用酒精棉球擦手,，并對接種工具用酒精燈火焰燒灼。
④用手術(shù)刀片將材料切割成若干片段,，并迅速接種入培養(yǎng)基中,。接種時，錐形瓶（或試管）應(yīng)斜向火焰,，在酒精燈火焰附近操作,。
⑤材料接種好后，將錐形瓶瓶口在酒精燈火焰上轉(zhuǎn)動燒一遍,，蓋好瓶蓋,，注明材料名稱及接種日期。
材料接種后,，應(yīng)置于26～28℃的培養(yǎng)室中進(jìn)行培養(yǎng),。
步驟二：青海發(fā)光桿菌植株誘導(dǎo)
本階段是組織培養(yǎng)中zui重要的一環(huán)。在培養(yǎng)基中植物激素的作用下,，外植體通過三條途徑迅速增殖,，這就是側(cè)芽增殖、誘導(dǎo)不定芽的形成和誘導(dǎo)胚狀體的形成,。
* RT 5克 乙酸鈰
* RT,，避光 1克 2-氨基聯(lián)苯
* 5克 硼氫化鈉
* RT 5克 異丙胺
* RT 1克 脫脂奶粉
* 2～8℃，避光 1克 肝浸粉（牛）
* RT,，避光 25克 瓊脂粉
* RT,，避光 100克 小牛浸膏粉
* RT，避光 5克 三號膽鹽
* RT 100克 豬膽鹽
* RT,，避光 100克 酶水解干酪素
* 100克 小牛血清
青海發(fā)光桿菌
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