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費(fèi)氏弧菌發(fā)光桿菌轉(zhuǎn)化操作步驟
（1）事先將恒溫水浴的溫度調(diào)到42℃,。
（2）從-70℃ 超低溫冰柜中取出一管（100μl）感受態(tài)菌,，立即用手指加溫融化后插入冰上，冰浴5~10min,。
（3） 加入5μl連接好的質(zhì)?；旌弦海―NA含量不超過(guò)100ng），輕輕震蕩后放置冰上20min,。
（4） 輕輕搖勻后插入42℃水浴中1~2min進(jìn)行熱休克,，然后迅速放回冰中，靜置3~5min,。
（5） 在超凈工作臺(tái)中向上述各管中分別加入500μl LB培養(yǎng)基（不含抗菌素）輕輕混勻,，然后固定到搖床的彈簧架上37℃震蕩1h.
（6） 在超凈工作臺(tái)中取上述轉(zhuǎn)化混合液100~300μl，分別滴到含合適抗菌素的固體LB平板培養(yǎng)皿中,，用酒精燈燒過(guò)的玻璃涂布棒涂布均勻（注意：玻璃涂布棒上的酒精熄滅后稍等片刻,，待其冷卻后再涂）。
（7） 如果載體和宿主菌適合藍(lán)白斑篩選的話(huà),，滴完菌液后再在平板上滴加40μl 2% X-gal,，8μl 20% IPTG，用酒精燈燒過(guò)的玻璃涂布棒涂布均勻,。
（8） 在涂好的培養(yǎng)皿上做上標(biāo)記,，先放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱中30-60min直到表面的液體都滲透到培養(yǎng)基里后，再倒置過(guò)來(lái)放入37℃恒溫培養(yǎng)箱過(guò)夜,。
（9） 在被費(fèi)氏弧菌發(fā)光桿菌污染的桌面上噴灑70%乙醇,，擦干桌面，寫(xiě)實(shí)驗(yàn)報(bào)告,。
（10）觀(guān)察平板上長(zhǎng)出的菌落克隆,，以菌落之間能互相分開(kāi)為好。注意白色菌斑。
    含量：    進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    去甲氧基姜黃素    20mg/支    英文名稱(chēng)    Demethoxycurcumin    規(guī)格:
雙去甲氧基姜黃素    含量：    進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    雙去氧基姜黃素    20mg/支    英文名稱(chēng)    Bisdemethoxycurcumin    規(guī)格:
姜黃醇    含量：    進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    莪術(shù)醇    20mg/支    英文名稱(chēng)    Curcumol    規(guī)格:
槲皮素-3-半乳糖苷    含量：    進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    金絲桃苷    20mg/支    英文名稱(chēng)    Hyperoside    規(guī)格:
    含量：    進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    金絲桃素    20mg/支    英文名稱(chēng)    Hypericin    規(guī)格:
    含量：    進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    絞股藍(lán)皂苷    20mg/支    英文名稱(chēng)    Stevenleaf    規(guī)格:
扁桃苷    含量：    進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    苦杏仁苷    20mg/支    英文名稱(chēng)    Amygdalin    規(guī)格:
    含量：    進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)    苦參堿    20mg/支    英文名稱(chēng)    Matrine    規(guī)格:
費(fèi)氏弧菌發(fā)光桿菌