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費氏弧菌發(fā)光桿菌實體在切割前要基部菌柄完整,，用透明膠把羊肚菌整個纏繞密封,，中間不留空隙。
     所述的抗生素平板培養(yǎng)基為:馬鈴薯400g,草炭l00g,葡萄糖20g,，磷酸二氫鉀lg,硫酸鎂0. 5g,酵母膏50g,，瓊脂20g、水1000mL,鏈霉素30U/mL,，青霉素30U/mL, pH6.5
     所述抗生素平板培養(yǎng)基的制作方法為:土豆削皮切薄皮加3000m1.水煮30min,，過濾取2000mL，加入草炭,，小火浸煮20min,，過濾取濾液1000mL，在此濾液中加入葡萄糖、酵母膏,、瓊脂,、磷酸二氫鉀、硫酸鎂,，小火煮至瓊脂溶解,，定容至1000mL，分裝于三角瓶,，在高溫121℃-126'C,高壓0. 1-0. 14MPa滅菌30min,。待冷卻至50℃左右加入青霉素鈉、硫酸鏈霉素復合抗生素母液,，使抗生素終濃度在30U/ml.左右,，將配好的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中或直接冷卻成固體培養(yǎng)基。
     本技術(shù)的分離方法,，先是對羊肚菌進行封閉式消毒,，防止消毒酒精浸入菌組織，有利分離成功,。另外，割掉子實體頭部后,，露出的菌柄內(nèi)側(cè)為無菌組織,，環(huán)割取內(nèi)側(cè)菌肉組織防雜效果較好。采用抗生素培養(yǎng)基也有利于防止雜菌污染,，培養(yǎng)基的組分營養(yǎng)非常全面,，特別是加入草炭和酵母膏，為羊肚菌菌絲生長提供了保證,。本發(fā)明的整個操作過程不用消毒液,，全用火焰消毒，萌發(fā)率較高,，既保證了容易萌發(fā),，同時也能降低污染，并能較順利的分離到羊肚菌菌種,。
具體實施方式
    本實施例的分離費氏弧菌發(fā)光桿菌的方法,，包括以下步驟:將膠帶封閉的羊肚菌用75%
消毒酒精均勻擦拭后，用燒灼的手術(shù)刀片從菌柄頂端在火焰上方切割掉子實體頭部,，露出的新鮮菌柄橫切面,，在火焰上輕快過兩下。用手術(shù)刀在新鮮菌柄內(nèi)側(cè)環(huán)割菌柄新鮮菌肉組織送入抗生素平板培養(yǎng)基上,，25℃培養(yǎng),，待萌發(fā)出菌絲后，及時轉(zhuǎn)接?？股仄桨迮囵B(yǎng)基為:馬鈴薯400g,，草炭l00g,葡萄糖20g，磷酸二氫鉀lg,，硫酸鎂0. 5g,酵母膏50g,，瓊脂20g、水1000mL,，鏈霉素30U/mL,，青霉素30U/mL, pH6.5，其制作方法為:土豆削皮切薄皮加3000mL水煮30min,，過濾取2000mL,，加入草炭，小火浸煮20min,，過濾取濾液I000ml,在此濾液中加入葡萄糖,、酵母膏、瓊脂,、磷酸二氫鉀,、硫酸鎂,，小火煮至瓊脂溶解,，定容至1000mL,，分裝于三角瓶,，在高溫121℃-126℃,、高壓0. 1-0. 14MPa滅菌30min,。
    待冷卻至50℃左右加入青霉素鈉,、硫酸鏈霉素復合抗生素母液,，使抗生素終濃度在30U/mL左右,，將配好的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中或直接冷卻成固體培養(yǎng)基,。其中，羊肚菌子實體在切割前要基部菌柄完整,，用透明膠把費氏弧菌發(fā)光桿菌整個纏繞密封，中間不留空隙,。