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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)背景的方法
 如果您一直被背景問題所困擾,，那么也許您該花些時(shí)間來優(yōu)化封閉液。這可能需要時(shí)間,，但也是值得的,。目前主要有兩種類型的封閉液：蛋白和非離子型去污劑。您使用的類型須取決于多個(gè)因素,，包括微孔板的表面試劑,、ELISA試劑盒吸附的抗原、您的抗體和檢測(cè)試劑,。好的封閉液應(yīng)降低非特異性結(jié)合,，但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測(cè)試劑發(fā)生相互作用,。
    ELISA實(shí)驗(yàn)zui常用的非離子型去污劑是Tween-20,。這種封閉液便宜、穩(wěn)定,，在去除洗滌過程中的一些非特異結(jié)合上很有用,。但它們只在存在時(shí)起作用,，ELISA試劑盒因?yàn)楹苋菀妆幌吹簟Ｒ虼怂邢礈煲褐幸脖仨毺砑臃忾]液,。請(qǐng)勿使用高濃度（正常濃度為0.01-0.1%）,，它會(huì)降低特異結(jié)合，產(chǎn)生假陰性,。另一個(gè)選擇是使用蛋白和非離子型去污劑這兩種封閉液,，后者可協(xié)助洗滌過程中的封閉,。
    蛋白封閉液則有所不同,，是*的。它們與開放位點(diǎn)結(jié)合并封閉,，同時(shí)穩(wěn)定與微孔板結(jié)合的抗原分子,。常用的蛋白封閉液包括牛血清白蛋白（BSA）、脫脂奶粉,、正常血清和魚明膠,。血清組分的內(nèi)在多樣性可使它有效攔截許多不同類型的分子相互作用。不過,，它的缺點(diǎn)在于能與ProteinA和IgG抗體相互作用,。解決這個(gè)問題的一種方法是使用雞或魚的正常血清。