亮發(fā)光桿菌使用 HPLC 檢測各菌株發(fā)酵產(chǎn)物次生代謝產(chǎn)物的差異情況，分析流動相為：乙腈-水(2‰的乙酸),，流速：0.6 mL/min,，均采用全波長掃描。HPLC 洗脫條件： 0–40 min ： 10%–50% 乙腈梯度,， 40–50 min：50%–75%乙腈梯度,，50–60 min： 75%–100%乙腈梯度，60–68 min：純乙腈洗脫,， 70–90 min：10%乙腈平衡柱子,。色譜柱為：分析柱為 Agilent 5 TC-C18(2) 250 mm×4.6 mm，SN： 588925-902,，PN：509550,。進(jìn)樣體積為 10 μL。
利用 10 g的60–100目層析硅膠將制備好的粗提物進(jìn)行拌樣,。然后,，使用 60 g 的 200–300 目層析硅膠進(jìn)行干法裝柱，層析柱的規(guī)格為：4 cm×60 cm,。待上樣完成后,，使用醇為洗脫劑進(jìn)行梯度洗脫,。首先使用500 mL 進(jìn)行洗脫，再逐漸增加洗脫劑中甲醇的比例,，當(dāng)洗脫劑中: 甲醇的比例為20∶1 時(洗脫體積為 1.5 L),，利用 HPLC 檢測該組分，發(fā)現(xiàn)了一個化合物與?PKS-3 發(fā)酵樣品中所缺少的化合物的保留時間和特征吸收波長均一致,，該份樣品命名為SF1,。當(dāng)洗脫劑:甲醇的比例為 10∶1 時(洗脫體積為 1.2 L)，將洗脫下來的組分利用HPLC 檢測,，發(fā)現(xiàn)含有 ?PKS-9 中缺少的化合物,，該份樣品命名為SF2。
接下來,，亮發(fā)光桿菌將含有目標(biāo)化合物的兩份樣品,，分別使用 Sephadex LH-20 進(jìn)行凝膠過濾色譜純化 (色譜柱規(guī)格為 1.8 cm×160 cm)，洗脫劑為甲醇,，流速為 6–8 d/min,，然后，分別將含有目標(biāo)化合物的樣品進(jìn)行減壓干燥后,，繼續(xù)分離純化。其中,，SF1 組分利用正相硅膠柱層析(色譜柱規(guī)格為 1.5 cm×50 cm),，裝柱硅膠為 18.5 g，洗脫劑為石油醚：丙酮=85：15,，分別收集洗脫組分,，將含有較純化合物的組分進(jìn)行減壓干燥，zui終得到化合物 SF1 的純品約 100 mg,。SF2 組分再利用正相硅膠柱層析(色譜柱規(guī)格為 1.5 cm×50 cm),，裝柱硅膠為 15.0 g，利用：甲醇=10：1 進(jìn)行洗脫,，將含有較純的目標(biāo)化合物組分進(jìn)行減壓干燥,，zui終得到化合物 SF2 的純品為 20 mg。
Ciclopirox Related Compound A 25mg 環(huán)吡酮相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
Ciclopirox Related Compound B 25mg 環(huán)吡酮相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 14818-35-0
Cilastatin Ammonium Salt 100mg 西司他丁銨標(biāo)準(zhǔn)品
Cilostazol 200mg 西洛他唑標(biāo)準(zhǔn)品 73963-72-1
Cimetidine 200mg 西咪替丁標(biāo)準(zhǔn)品 51481-61-9
Cimetidine Hydrochloride 200mg 鹽酸西咪替丁標(biāo)準(zhǔn)品 70059-30-2
Cinoxacin 200mg 西諾沙星標(biāo)準(zhǔn)品 28657-80-9
Ciprofloxacin 200mg 環(huán)丙沙星標(biāo)準(zhǔn)品 85721-33-1
Ciprofloxacin Formamide 125mg 環(huán)丙沙星甲酰胺標(biāo)準(zhǔn)品 93594-39-9
Ciprofloxacin Hydrochloride 400mg 鹽酸環(huán)丙沙星標(biāo)準(zhǔn)品 86393-32-0
亮發(fā)光桿菌
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