獲得亮發(fā)光桿菌的一種方法,。具體操作方法,,有以下幾種:
①種菇孢子彈射法:選擇個體健壯、朵形圓正,,無病蟲害,、出菇均勻、高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn),,適應(yīng)性強的八九分成熟的種菇,,切去大部分,菌柄用無菌水沖洗數(shù)遍后再用已滅菌的紗布或脫脂棉,、濾紙吸干表面水分,。在接種箱或無菌室內(nèi),把種菇的菌褶朝下用鐵絲倒掛在玻璃漏斗下面,,漏斗倒蓋在培養(yǎng)皿上面,;上端小孔用棉花塞住。培養(yǎng)皿放在一個鋪有紗布的搪瓷盤上,,靜置12~20小時,,菌褶上的孢子就會散落在培養(yǎng)皿內(nèi),。形成一層粉末狀孢子印(平菇極淡紫色,,蘑菇,、草菇 為褐色,香菇,、金針菇孢子印白色),。用接種針沾取少量孢子在試管中的瓊脂外面或培養(yǎng)皿上劃線接種。待孢子萌發(fā),,生成菌落時,,選孢子萌發(fā)早、長勢好的菌落進行試管培養(yǎng),。
還可用孢子采集器收集孢子,。方法是選好種菇后,按上述程序,,輕輕掀開玻璃鐘罩,,將種菇柄朝下插在孢子采收器的鋼絲架上,放在培養(yǎng)皿正中央,。隨即蓋好玻璃罩,,用紗布將鐘掌周圍塞好。并在紗布上倒少許無菌水,。移入 20℃左右恒溫箱培養(yǎng),。
②褶上涂抹法:按無菌操作分離時;應(yīng)選擇成熟的種菇,,用接種針直接插入褶片之間,,輕輕抹取褶片表面子實體尚未彈射的孢子,再在培養(yǎng)基上劃線接種,。
③鉤懸法:取成熟菌蓋的幾片菌褶或一小塊耳片(黑木耳,、毛木耳、白木耳〕,,用無菌不銹鋼絲(或鐵絲,、棉線等其他懸掛材料)懸掛于三角瓶內(nèi)的培養(yǎng)基的上方,勿使接觸到培養(yǎng)基或四周瓶壁,。置適宜溫度下培養(yǎng),、轉(zhuǎn)接即可。
④貼附法:按無菌操作將成熟的菌褶或耳片取一小塊,, 亮發(fā)光桿菌用溶化的瓊脂培養(yǎng)基或阿拉伯膠,、漿糊等貼附在配管斜面培養(yǎng)基正上方的試管壁上。經(jīng)6~12小時的培養(yǎng),待孢子落在斜面上,,立即把孢子連同部分瓊脂培養(yǎng)基移植到新的試管中培養(yǎng)即可,。
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