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ELISA試劑盒幾大要素

閱讀:912      發(fā)布時(shí)間:2016-4-13
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    在ELISA檢測(cè)系統(tǒng)的關(guān)鍵要素中,,包被原的性質(zhì)很重要,,蛋白濃度,,是否降解,,這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識(shí)別,所以保留抗原很重要,,ELISA試劑盒我做重組蛋白時(shí),,一定要在冰浴下緩慢融化就是這個(gè)道理。封鎖就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地空閑,,從而排斥ELISA后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附,。但有時(shí)因?yàn)樵囼?yàn)的需要,,包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來(lái)包。
    試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA),。該法適于測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)上清,、血清、血漿及組織液中的樣本,,干擾小可以測(cè)到每毫升納克水平的細(xì)胞因子(或受體)的水平,。在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體;②酶標(biāo)記的抗原或抗體,;③酶作用的底物,。
    根據(jù)ELISA試劑盒試劑的來(lái)源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法,。
 (1) 雙抗體夾心法,;
 (2) 雙位點(diǎn)一步法;
 (3) 間接法測(cè)抗體,;
 (4) 競(jìng)爭(zhēng)法,;
 (5) 捕獲法測(cè)IgM抗體;
 (6) 應(yīng)用親和素和生物素,。
    試劑盒普遍用作非放射性同位素的成鍵化驗(yàn),。在這種方法中,通常標(biāo)準(zhǔn)配體是固定的,,通過(guò)加入溶液相受體或蛋白質(zhì)來(lái)使之成鍵,。通過(guò)加入與受體特異性反應(yīng)的抗體來(lái)定量成鍵的受體,ELISA試劑盒而且zui初抗體的量以加入第二種能顯色的抗體測(cè)量,。第二種抗體能識(shí)別抗體的末端,,在其末端的堿性磷酸酯或過(guò)氧化物酶等與酶發(fā)生反應(yīng),從而使溶液顯色,。
操作注意:
 (1) 試劑盒保存在2-8℃,,使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用,。
 (2) 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,,密封(低溫干燥)保存。
 (3) 嚴(yán)格按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液量及順序進(jìn)行溫育操作,。
 (4) 所有液體組分使用前充分搖勻。

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