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ELISA的應(yīng)用與操作注意事項

閱讀:1210      發(fā)布時間:2015-11-4
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ELISA的應(yīng)用

    ELISA法是免疫診斷中的一項新技術(shù),,現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷,。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏,、特異,、簡單、快速,、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點,。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體,,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,,可概括四個方面:

1,、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。

2,、研究抗酶抗體的合成,。

3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng),。

4,、定量檢測體液中抗原或抗體成份。

ELISA操作注意事項

1. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存。

2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,,以免變質(zhì)。

3. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用。

4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器,。

5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6. 洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
于光下。避免用手接觸,,有毒,。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。

7. 底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,避免長時間暴露

8. 加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣,。抗體

9. 按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。

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