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    介紹一種質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí)免熱激及孵育的方法,。

    背景：目前外源質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌的步驟,，需要先將質(zhì)粒和感受態(tài)細(xì)胞在冰上撫育半小時(shí)，然后42度熱激90秒,，加液體培養(yǎng)基緩搖1個(gè)小時(shí)左右再離心涂板,。其中熱激步驟溫度和時(shí)間要求嚴(yán)格，熱激后大量菌細(xì)胞死亡,，還要經(jīng)過(guò)液體培養(yǎng)基撫育才能涂板,。

   方法改進(jìn)：我們可以在做質(zhì)粒和感受態(tài)細(xì)胞在冰上撫育的同時(shí)，將要涂的平板放在37度培養(yǎng)箱里,，當(dāng)撫育結(jié)束后,，立即涂到已經(jīng)加熱到37度的平板上，利用培養(yǎng)板的熱度代替熱激,，平板可以直接放回培養(yǎng)箱倒置培養(yǎng),。由于溫度相對(duì)溫和，細(xì)胞死亡的少,，之后的液體培養(yǎng)基撫育過(guò)程也省掉了,。

    這個(gè)方法我們一直在用，質(zhì)?？梢猿晒D(zhuǎn)進(jìn)菌體中,，只要感受態(tài)細(xì)胞沒(méi)有問(wèn)題，其轉(zhuǎn)化率和使用熱激法差不多,，而且若是新鮮制備的感受態(tài)細(xì)胞,，轉(zhuǎn)化率甚至更高?？梢允∠?2度水浴裝置的儀器,，還節(jié)省了至少1個(gè)小時(shí)的時(shí)間,。