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    介紹一種質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌時免熱激及孵育的方法,。

    背景：目前外源質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌的步驟，需要先將質(zhì)粒和感受態(tài)細胞在冰上撫育半小時,，然后42度熱激90秒,，加液體培養(yǎng)基緩搖1個小時左右再離心涂板。其中熱激步驟溫度和時間要求嚴格,，熱激后大量菌細胞死亡,，還要經(jīng)過液體培養(yǎng)基撫育才能涂板。

   方法改進：我們可以在做質(zhì)粒和感受態(tài)細胞在冰上撫育的同時,，將要涂的平板放在37度培養(yǎng)箱里,，當撫育結(jié)束后，立即涂到已經(jīng)加熱到37度的平板上,，利用培養(yǎng)板的熱度代替熱激，平板可以直接放回培養(yǎng)箱倒置培養(yǎng),。由于溫度相對溫和,，細胞死亡的少,，之后的液體培養(yǎng)基撫育過程也省掉了。

    這個方法我們一直在用,，質(zhì)?？梢猿晒D(zhuǎn)進菌體中，只要感受態(tài)細胞沒有問題,，其轉(zhuǎn)化率和使用熱激法差不多,，而且若是新鮮制備的感受態(tài)細胞，轉(zhuǎn)化率甚至更高,?？梢允∠?2度水浴裝置的儀器，還節(jié)省了至少1個小時的時間,。