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前期準備

        利用ELISA試劑盒進行臨床檢驗常見的樣本一般包括血液（指

血，靜脈血）,，尿,，糞便，腦脊液,，胸腹水,，前列腺液，精液

,，陰道分泌物等,，這些樣本收集的時間、方法和保存都有一定

的要求,。

樣本實驗準備
在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,，必須清楚要檢測的成

份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天就進行
檢測的樣本,，ELISA試劑盒及時儲存在4℃?zhèn)溆?。對于隔天再檢測的樣本，及

時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?，有條件的,，-70℃凍存?zhèn)溆谩?/p>

標本應(yīng)避免反復(fù)凍融。
    液體類標本:  包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、腦脊液,、

細胞培養(yǎng)上清等。
1. 血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000

轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離

心,。
2. 血漿：
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，混

合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收

集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
3. 尿液：
用無菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收

集上清,。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。胸腹水,、腦

脊液參照此實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集,。離心20分鐘左右（2000

-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,。
5. 培養(yǎng)細胞
    檢測細胞內(nèi)的成份時,，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液

，細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白

萃取試劑,，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右

（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形

成，應(yīng)再次離心,。
6. 組織標本
    切割標本后,，稱取重量。加入一定量的PBS,，PH7.4,。用液

氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度,。加入

一定量的PBS（PH7.4）,，或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿

器將標本勻漿化。ELISA試劑盒離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細

收集上清。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用,。