產(chǎn)品名稱:
鯉上皮瘤細(xì)胞系(EPC) 產(chǎn)品類別:其他細(xì)胞系
生長特性:貼壁生長
培養(yǎng)體系:MEM+10%FBS,28°或者21°培養(yǎng)
傳代方法 :1:2傳代
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
規(guī)格:1×10^6cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號:E-XB6814
產(chǎn)品的運輸與保存:
視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行:
1.1ml凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;
收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進行培養(yǎng),,如無法立刻進行復(fù)蘇操作,,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保持1個月。
2.T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸,;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁,。
原代細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1.準(zhǔn)備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘,。開始工作前先洗手,、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:點燃酒精燈,,安裝吸管帽,。
3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,,去除血污,;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30~60分鐘,。
4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液,,然后一并倒入三角燒瓶中,,結(jié)扎瓶口或塞以膠塞,。
5.消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,,消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次,,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定,。
6.分離:在消化過程中見消化液發(fā)混濁時,,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細(xì)胞團或單個細(xì)胞,,立即終止消化,,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊,。低速(500~1000轉(zhuǎn)/分)離心消化液5分鐘,,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液,。
7.計數(shù):用計數(shù)板計數(shù),,如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大,再補加培養(yǎng)液調(diào)整后,,分裝入培養(yǎng)瓶中,。對大多數(shù)細(xì)胞來說,,pH要求在7.2~7.4范圍,,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,,說明液體變酸,,可用NaHCO3調(diào)整。
8.培養(yǎng):置于36.5℃溫箱培養(yǎng),,如用CO2溫箱培養(yǎng),,瓶蓋需擰松半圈。
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