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植酸酶生化檢測(cè)試劑盒的測(cè)定原理

閱讀:967      發(fā)布時(shí)間:2024-9-26
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測(cè)定意義:
植酸酶(phytase)是催化植酸及其鹽類(lèi)水解為肌醇與磷酸(鹽)的一類(lèi)酶的總稱,,屬磷酸單酯水解酶,它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉(zhuǎn)化為可供有機(jī)體利用的有效磷,,降低糞便中的磷含量,,減輕對(duì)環(huán)境的污染,改善營(yíng)養(yǎng)成分的吸收和利用,,因此具有極其廣泛的研究和應(yīng)用價(jià)值,。
測(cè)定原理:
植酸酶在一定溫度和pH值條件下,水解底物植酸鈉生成無(wú)機(jī)磷與肌醇衍生物,,無(wú)機(jī)磷在酸性環(huán)境中與鉬酸銨顯色劑反應(yīng)生成藍(lán)色復(fù)合物,,在700nm處有特征吸收峰,根據(jù)700nm處吸光值變化可計(jì)算得植酸酶活性,。
組成和配置:
試劑一:液體×1瓶,,室溫保存。
試劑二:液體×1瓶,,4℃保存,。              
試劑三:粉劑×2瓶,-20℃保存,。臨用前加入22mL試劑二,,現(xiàn)配現(xiàn)用。
試劑四:液體×1支,,4℃保存,。
粗酶液提?。?/div>
1、組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,。16000g,4℃離心20min,,取上清置冰上待測(cè),。
2、細(xì)菌,、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一),,冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,,間隔7秒,,總時(shí)間3min);16000g,,4℃離心20min,,取上清液置冰上待測(cè)。
3,、血清等液體:直接測(cè)定,。

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