培養(yǎng)基是指供給微生物,、植物或動物(或組織)生長繁殖的,,由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì),。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì),、無機(jī)鹽(包括微量元素),、維生素和水等幾大類物質(zhì)。
培養(yǎng)基的配制:
1.配料
配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,,取藥后立即蓋上瓶蓋)。
2.溶解
淀粉溶解:少量冷水調(diào)成糊狀,。
加熱溶解,,特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基,一定要煮沸,,瓊脂的熔解溫度95-97℃ ,,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。
3.調(diào)PH
用1N的鹽酸或1N的NaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值,。
4.過濾
濾紙或棉花進(jìn)行過濾,。(有時可以省去)
5.分裝
一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。
(1)三角瓶
若作靜置培養(yǎng),,則100ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,,最多不能超過150ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,否則滅菌時培養(yǎng)基沸騰容易污染棉塞,,造成染菌;若作搖瓶培養(yǎng),,則15-20ml培養(yǎng)基/250ml的三角瓶,,保證通氣良好。
(2)試管分裝
液體培養(yǎng)基一般裝4-5ml,,約試管的1/4高度,;固體斜面培養(yǎng)基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度,。
6.包扎
分裝好后,,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,,防止滅菌時水份進(jìn)入把棉塞弄濕,。
7.滅菌
按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,。如果滅菌的溫度太高,,營養(yǎng)成分會被破壞,培養(yǎng)基中的糖,、氨基酸會使培養(yǎng)基的顏色變深,。
8.擺斜面
滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,,使其凝固成為一個斜面,約占試管長度的1/2,。
9.貯存
培養(yǎng)基在30℃下放置一天,,無污染的即可使用,。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用,。
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