細(xì)胞系（cell line）指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)首次傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體,。 也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。（由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系（FiniteCellLine）,、無限細(xì)胞系（InfiniteCellLine）），因此,，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞（特定環(huán)境下口語和書面語都使用）,，廣義是指可傳代的細(xì)胞。
細(xì)胞傳代：
a,、棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
b,、加1mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞,，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min（視細(xì)胞情況而定）,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000rpm離心5min,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
c,、將細(xì)胞懸液按1：2比例分到新的含8mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例；a,、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,，裝入無菌離心管中，1000rpm條件下離心4min,，棄去上清液,，用PBS清洗一遍，棄盡PBS,，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù),。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,，注意凍存管做好標(biāo)識,。將凍存管放入-80℃冰箱，24h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
復(fù)蘇細(xì)胞：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000rpm條件下離心3min,，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,，加入約8mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
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