什么是細胞培養(yǎng),？
細胞培養(yǎng)是指將細胞從動物或植物體內(nèi)取出,，然后在適宜的人工環(huán)境中生長的過程。細胞可以在培養(yǎng)前直接從組織中取出并通過酶或機械方法進行解離,，也可以來源于已建立的細胞系或細胞株,。
原代培養(yǎng)：
原代培養(yǎng)是指細胞從組織中分離出來后，在適宜條件下增殖,，直到它們占據(jù)所有可用的基質(zhì)（即達到匯合狀態(tài)）的培養(yǎng)階段,。在此階段，必須通過將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮生長培養(yǎng)基的新容器中進行繼代培養(yǎng)（即傳代）,，以為其提供更多的繼續(xù)生長空間,。
細胞系：
第一次傳代培養(yǎng)后，原代培養(yǎng)物即被稱為細胞系,。來自于原代培養(yǎng)的細胞系壽命有限（即：有限細胞系）,，隨著細胞的傳代，生長能力的細胞會占據(jù)優(yōu)勢,，最終導(dǎo)致細胞群體在基因型和表型上達到一定程度的均一性,。
細胞株：
如果通過克隆或其他方法從培養(yǎng)物中陽性篩選出了細胞系的亞群，則該細胞系成為一個細胞株,。與親代細胞系起始時相比,，細胞株通常會獲得一些其他的遺傳學(xué)改變。
注意事項：
（1）無菌操作：細菌或霉菌污染是培養(yǎng)失敗的常見原因,，必須加強各個環(huán)節(jié)的無菌操作觀念,，以預(yù)防為主，一旦污染,，一般很難消除,。
（2）培養(yǎng)液：所用的培養(yǎng)液必須滿足細胞生存和生長的必要條件,。由于細胞來源的動物種類、組織類型不同,，對培養(yǎng)液的要求有一定的差異,，必要時可用預(yù)實驗的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。
（3）胎牛血清：胎牛血清對于維持培養(yǎng)細胞的生存和促進細胞增殖起著關(guān)鍵性作用,?？蛇x擇多種不同批號的胎牛血清進行小樣分析。一旦確定某一廠家的某一批號胎牛血清后,，就保持應(yīng)用至實驗完成,。
（4）：必須新鮮配制，貯存時間過長(即使是-20℃低溫保存),，也將影響消化效力,，導(dǎo)致消化時間過長，細胞損傷增加,。
（5）L-幾乎所有細胞對有較高的要求,，細胞需要核酸和蛋白質(zhì)，在缺時,，細胞會因生長不良而死亡,。液中很不穩(wěn)定，加有養(yǎng)液在4℃冰箱貯存兩周以上時,，就應(yīng)重新加入原來量的,。
（6）靜置培養(yǎng)：原代細胞在消化分離后，置于CO2培養(yǎng)箱的頭24～48h (必要時72h)內(nèi),，應(yīng)處于絕對靜置狀態(tài),，切忌不時地取出培養(yǎng)瓶觀察生長狀況，這將使原代分離細胞難以貼壁,，更談不上伸展和增殖,，初學(xué)者尤應(yīng)注意。不必擔(dān)心培養(yǎng)液中的營養(yǎng)成分會消耗光,，在細胞增殖之前對營養(yǎng)的要求并不大,。原代培養(yǎng)初期僅加一薄層培養(yǎng)液的目的也在于有利于細胞貼壁伸展。
（7）消化時間：一般消化至肉眼尚可見微小組織顆粒即可,，因為此時組織顆粒已經(jīng)松散,，略經(jīng)吹打即成細胞團或單個細胞，過久的消化往往導(dǎo)致細胞損傷加重,，細胞培養(yǎng)成活率降低,。
（8）其他生長因子：經(jīng)過以上處理，一般原代分離細胞培養(yǎng)均可以成功。對于少數(shù)特殊類型細胞也可以考慮加一些特殊的生長因子,，如胰島素能促使細胞攝取葡萄糖和氨基酸,。另外，內(nèi)毒素,、EGF,、FGF等均有促有絲分裂作用，但費用較高,。
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