一抗和二坑的區(qū)別:
第一抗體就是平常所說的抗體,,即能和抗原特異性結(jié)合,。
第二抗體是能和抗體結(jié)合的,即抗體的抗體,。主要用于檢測(cè)抗體的存在,。
一抗是針對(duì)抗原的抗體,二抗是針對(duì)一抗的抗體,。即抗體也可以充當(dāng)抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體,。也就是說,抗原進(jìn)入機(jī)體刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答,,由B細(xì)胞可以產(chǎn)生與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的特殊蛋白質(zhì),。
抗體溶解方法:
方法一:我們的抗體(凍干粉)已經(jīng)包含了0.01M PBS、1%BSA和0.1%防腐劑,,您只需要加入滅菌的雙蒸水就行了,。抗體溶解后,,置于-20℃保存,,分裝后使用,避免反復(fù)凍融,,可保證至少1年有效,;
方法二:也可以只加入一半體積的雙蒸水,再用一半體積的甘油補(bǔ)足,,置于-20℃保存,,這樣抗體不會(huì)凍,有利于抗體的穩(wěn)定,。
后續(xù)試驗(yàn)時(shí),,再使用對(duì)應(yīng)的緩沖液稀釋成工作液,即用即配,。
我們的抗體(凍干粉),在常溫放置下,,至少一個(gè)月有效,;若在-20℃下保存(推薦),至少三年有效,。
抗體修復(fù)方式:
修復(fù)液:0.01M枸櫞酸(pH6.0)或者0.05M EDTA(pH8.0)
抗體修復(fù)方法:
方法1:沸水浴修復(fù),,將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于沸水浴環(huán)境,保持外部沸騰狀態(tài)15min,,自然冷卻至室溫,。
方法2:微波修復(fù),將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于微波爐中,,高火5min,,?;?min,中火5min,,自然冷卻至室溫,。
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