3磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)生化檢測試劑盒是糖酵解途徑的關(guān)鍵酶，與糖異生途徑,、體內(nèi)血糖濃度的維持和糖尿病的發(fā)生密切相關(guān),。
測定意義：
GAPDH催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸，是糖酵解途徑的關(guān)鍵酶,，與糖異生途徑,、體內(nèi)血糖濃度的維持和糖尿病的發(fā)生密切相關(guān)，在機體糖,、脂,、蛋白代謝紊亂疾病中發(fā)揮重要作用。
測定原理：
3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸,。GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛,、無機磷和NAD，340nm處測定NADH的減少量可反映GADPH活性的高低,。
需自備的儀器和用品：
分光光度計/酶標(biāo)儀,、恒溫水浴鍋,、臺式離心機、可調(diào)式移液器,、微量石英比色皿/96孔板,、研缽、冰和蒸餾水,。粗酶液提?。?/div>
1、組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織,，加入1mL試劑一）進行冰浴勻漿,。16000g，4℃離心20min,，取上清置冰上待測,。
2、細(xì)菌,、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一）,，冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒,，間隔7秒,，總時間3min）；16000g,， 4℃離心20min,，取上清液置冰上待測。
3,、血清等液體：直接測定,。
ADH測定操作：
1. 分光光度計預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長到340nm,，蒸餾水調(diào)零,。
2. 試劑三在25℃水浴中保溫30min。
3. 在1mL石英比色皿中依次加入100μL樣本上清液,、800μL試劑三和100μL試劑四,，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值,，分別記為A1和A2,。△A測定管=A1-A2,。
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