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　　1,、定量準(zhǔn)確、實(shí)驗(yàn)耗時(shí)短

　　從探針法qPCR原理可以看出,，擴(kuò)增引物和探針序列都匹配后擴(kuò)增的產(chǎn)物才能產(chǎn)生熒光信號,，這樣就確保了熒光信號是目的片段的擴(kuò)增產(chǎn)生的，排除了非特異性擴(kuò)增的影響,，特別是針對一些低拷貝和低濃度的樣品,，檢測結(jié)果所見即所得，從而保證了檢測的準(zhǔn)確性,。因探針法qPCR的高特異性,，因此無需再設(shè)置熔解曲線檢測擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性如何，有效縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間,。

 

　　2,、特異性高

　　在探針法qPCR中，除加入引物外還增加一條特異性探針,，當(dāng)引物和探針都與靶基因結(jié)合時(shí),，擴(kuò)增時(shí)探針才會(huì)被水解酶切發(fā)出熒光。當(dāng)引物發(fā)生非特異性擴(kuò)增時(shí),，探針不會(huì)結(jié)合到非特異性片段上,，因此不會(huì)被水解酶切而發(fā)出熒光，從而提高了特異性,。

 

　　3,、兼容多重反應(yīng)

　　在探針的5'端標(biāo)記不同的熒光修飾，則不同的探針在檢測過程中就會(huì)發(fā)出不同的熒光信號,。根據(jù)此原理可以將檢測不同目的基因或者基因型的探針標(biāo)記不同的熒光修飾做混合檢測,，這樣就可以做多重檢測，檢測對應(yīng)的熒光信號就是檢測對應(yīng)探針的熒光定量結(jié)果,。多重檢測大大節(jié)省了檢測的物料試劑成本,，也大大節(jié)省了檢測時(shí)間，進(jìn)一步提高了檢測的速度和適用性,。

 

　　探針法qPCR試劑盒的實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：

　　1）PCR可以檢測組織,、細(xì)胞、血液,、細(xì)菌等很多材料,，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況,；

 

　　2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息,、物種,、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；

 

　　3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品,。

 

　　4）樣本保存于液氮或干冰,，也可以保存于Trizol液中。