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鸚鵡喙羽病病毒PCR檢測試劑盒使用及效果

閱讀:751      發(fā)布時間:2022-10-25
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鸚鵡喙羽病病毒PCR檢測試劑盒使用及效果:

PCR反應特點

(1) 特異性強

PCR反應的特異性決定因素為:

①引物與模板DNA特異正確的結合;

②堿基配對原則,;

③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性,;

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結合是關鍵,。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,,結合的特異性大大增加,,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),,其特異性程度就更高,。

(2) 靈敏度高

PCR產物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞,;在病毒的檢測中,,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌,。

(3) 簡便,、快速

PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,,不一定要用同位素,無放射性污染,、易推廣,。

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