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人鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原2elisa檢測試劑盒雙抗體夾心法

閱讀:862      發(fā)布時(shí)間:2022-6-9
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人鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原2(SCCAg-2)elisa檢測試劑盒雙抗體夾心法(檢測未知抗原)

1,、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,,4℃ 過夜,。次日,棄去孔內(nèi)溶液,,用洗滌緩沖液洗3次,。

2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,,置37℃ 孵育1小時(shí),。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔),。

3,、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml,。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),,洗滌。

4,、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,,37℃ 10~30分鐘。

5,、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml

6,、結(jié)果判定:可于白色背景上,,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,,陽性程度越強(qiáng),,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,,以“+",、“-"號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,,于450nm(若以ABTS顯色,,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,,即為陽性。大鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)ELISA Kit,,48T/96T 

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