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人血管緊張素1-7(Ang1-7)ELISA試劑盒?操作步驟

閱讀:808      發(fā)布時(shí)間:2022-3-15
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人血管緊張素1-7(Ang1-7)ELISA試劑盒操作步驟:


1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃。


2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;


3.  樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加,。


4.  除空白孔外,,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。


5.  棄去液體,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液(350μL),,靜置1min,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板),。


6.  每孔加入底物A、B各50μL,,37℃避光孵育15min,。


7.  每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),,在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。


[實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算]


以所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),,在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,,計(jì)算出樣品的濃度,。

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