PCR檢測試劑盒利用離心柱內(nèi)硅基質膜提取豬偽狂犬病毒DNA，以此為模板,，在特異引物和TaqDNA聚合酶的作用下,，經(jīng)高溫變性，低溫退火、中溫延伸的循環(huán),，使特異的DNA的片段拷貝數(shù)放大一倍,。經(jīng)過30次循環(huán)，使擴增的DNA的片段放大數(shù)百萬倍,。將擴增的DNA的片段進行電泳,，經(jīng)染色后在紫外燈照射下，肉眼可見DNA的片段的擴增帶,，進而判斷待檢樣本中是否含有豬偽狂犬病毒,。
PCR檢測試劑盒具有下列特點：
1.根據(jù)DHBV的保守序列設計的引物，與相關病毒無交叉反應,。
2.靈敏度比常規(guī)PCR高2-3個數(shù)量級,，可以達到幾百拷貝/反應。
3.即開即用,，用戶只需要提供樣品模板,，操作簡單，定量準確快速,。
4.一管式熒光定量PCR檢測,，避免后續(xù)污染。
5.足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR,。
PCR檢測試劑盒的檢測步驟：
1.核酸提取
樣品進行適當處理后,，可采用核酸提取試劑盒，該試劑盒可用于對樣本中病毒RNA的提取,，請按照說明書進行操作,。也可選擇其他合適的商品化產(chǎn)品。
2.擴增試劑的準備
將各試劑按照用量加入無菌離心管中,，充分混勻,，短暫離心后在PCR反應管中分別加入18μL混合液。
3.加樣
將制備好的樣本,，陰性對照,，陽性對照各取2μL分別加入對應反應管中，加完后蓋緊PCR反應管蓋,，置于PCR儀上,。
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