1. 自動洗板機:每孔加入洗滌液350μl,,注入與吸出間隔60秒,。洗板5次。
2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,,在潔凈的吸水紙上拍干,,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體,,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次,。
實驗開始前,,各試劑均應平衡至室溫;試劑或樣品配制時,,均需充分混勻,,并盡量避免起泡。
1.加樣:分別設空白孔,、標準孔,、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,,加樣時將樣品加于酶標板底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,。給酶標板覆膜,,37℃孵育2小時,。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液,。
2.棄去液體,,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),,酶標板加上覆膜,,37℃溫育1小時。
3.棄去孔內(nèi)液體,,甩干,,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,,大約350μl /每孔,,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,,加上覆膜,,37℃溫育1小時。
5.棄去孔內(nèi)液體,,甩干,,洗板5次,方法同步驟3,。
6.每孔加底物溶液100μl,,酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘,。當標準孔出現(xiàn)明顯梯度時,,即可終止)。
7.每孔加終止液50μl,,終止反應,,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同,。
8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值),。應提前打開酶標儀電源,預熱儀器,,設置好檢測程序。
9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束,。
脊髓小腦共濟失調(diào)2型蛋白抗體
芳香基硫酸酯酶H抗體
溴區(qū)結構域相鄰鋅指蛋白1A抗體
載脂蛋白1抗體
突觸融合結合蛋白6抗體
精氨酸酶1抗體
腺苷酸激酶結構域蛋白1抗體
三磷酸腺苷結合盒轉(zhuǎn)運蛋白7抗體
磷酸化鈉鉀ATP酶α1多肽抗體
Na+/K+-ATPase α1 鈉鉀ATP酶α1抗體
肌動蛋白樣蛋白6B抗體
脊髓小腦共濟失調(diào)蛋白7抗體
磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體
β淀粉樣前體蛋白結合蛋白1抗體(X11α)
載脂蛋白E抗體
甲胎蛋白AFP抗體
陰離子交換蛋白2抗體
鐵調(diào)節(jié)蛋白1抗體
三磷酸腺苷酶家族蛋白3A抗體
載脂蛋白J抗體
載脂蛋白H抗體
二磷酸腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶4抗體
AKIRIN2蛋白抗體
ADP核糖基化樣因子8B抗體
三磷酸腺苷酶家族蛋白2抗體
AKIRIN1蛋白抗體
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