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駱駝脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)elisa試劑盒?操作步驟

閱讀:622      發(fā)布時(shí)間:2021-9-23
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駱駝脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)elisa試劑盒操作步驟:


1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,,然后在di一,、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻,;然后從di一孔,、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三,、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,,再各取50μl分別加到第五,、第六孔中,再在第五,、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,,混勻,;混勻后從第五,、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,,再在第七,、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七,、第八孔中分別取50μl加到第九,、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉,。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,,120 ng/L ,,60 ng/L,30 ng/,,15 ng/L),。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用,。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外,。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5,。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值),。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(mouse sCD40L)

小鼠補(bǔ)體C3a(mouse C3a)

小鼠補(bǔ)體C5a(mouse C5a)

小鼠血清總補(bǔ)體(mouse CH50)

小鼠肌酸激酶(mouse CK)

小鼠肌酸激酶同工酶(mouse CK-MB)

小鼠羥甲基賴氨酸(mouse CML)

小鼠C-肽(mouse C-peptide)

小鼠心肌鈣蛋白T(mouse cTnT)

小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(mouse G-CSF)

小鼠粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(mouse GM-CSF)

小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(mouse M-CSF)

小鼠細(xì)胞色素C(mouse Cytochrome C)

小鼠雙鏈DNA(mouse dsDNA)

小鼠多巴胺(mouse Dopamine)

小鼠二胺氧化酶(mouse DAO)

小鼠D-二聚體(mouse D-Dimer)

小鼠二肽基肽酶Ⅳ(mouse DPP4)

小鼠β內(nèi)啡肽(mouse β-EP)

小鼠表皮生長(zhǎng)因子(mouse EGF)

小鼠表皮生長(zhǎng)因子受體(mouse EGF R)

小鼠內(nèi)皮素-1(mouse Endothelin-1)


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