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魚類甲狀腺素(T4)elisa試劑盒洗滌方法

閱讀:775      發(fā)布時間:2021-8-25
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魚類甲狀腺素(T4)elisa試劑盒洗滌方法:

1. 自動洗板機:每孔加入洗滌液350μl,,注入與吸出間隔60秒,。洗板5次。

2. 手工洗板:甩盡孔內液體,,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,,浸泡1-2分鐘,,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體,在厚的吸水紙上拍干,。洗板5次,。

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫,;試劑或樣品配制時,,均需充分混勻,并盡量避免起泡,。

1.加樣:分別設空白孔,、標準孔、待測樣品孔,??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,,注意不要有氣泡,,加樣時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,。給酶標板覆膜,37℃孵育2小時,。為保證實驗結果有效性,,每次實驗請使用新的標準品溶液,。

2.棄去液體,甩干,,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內配制),,酶標板加上覆膜,37℃溫育1小時,。

3.棄去孔內液體,,甩干,洗板 3次,,每次浸泡1-2分鐘,,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內液體拍干,。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內配制)100μl,,加上覆膜,37℃溫育1小時,。

5.棄去孔內液體,,甩干,洗板5次,,方法同步驟3,。

6.每孔加底物溶液100μl,酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據實際顯色情況酌情縮短或延長,,但不可超過30分鐘,。當標準孔出現明顯梯度時,即可終止),。

7.每孔加終止液50μl,,終止反應,此時藍色立轉黃色,。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同,。

8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀電源,,預熱儀器,,設置好檢測程序。

9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束,。

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