小鼠核因子κB亞基p65親和肽ELISA試劑盒做標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品檢測(cè)時(shí)有幾個(gè)問題需要注意
1,、樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出來的,所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實(shí)驗(yàn)還要重要的一件事,,否則后面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果無從談起,。
2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個(gè)比較大的跨度,,并且要能涵蓋你所要檢測(cè)實(shí)驗(yàn)樣品的濃度,,即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi),包括上限和下限,。而對(duì)于呈S型的標(biāo)準(zhǔn)曲線,,盡量要使實(shí)驗(yàn)樣品的濃度在中間坡度zui陡段,即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi),。
3,、采用倍比稀釋法配制標(biāo)準(zhǔn)曲線中的標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度,,這樣就能夠保證標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度不會(huì)出現(xiàn)較大的偏離,。
4、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)樣品時(shí),,應(yīng)按濃度遞增順序進(jìn)行,,以減少高濃度對(duì)低濃度的影響,提高準(zhǔn)確性,。
5,、標(biāo)準(zhǔn)曲線的樣品數(shù)一般為7個(gè)點(diǎn),但至少要保證有5個(gè)點(diǎn),。
6,、做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒?yàn)要求不同而有所變動(dòng),但一般來說,,相關(guān)系數(shù)R至少要大于0.98,,對(duì)于有些實(shí)驗(yàn),至少要0.99甚至是0.999.
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