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細胞色素試劑盒的使用方法和注意事項

閱讀:1412      發(fā)布時間:2021-3-27
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   細胞色素試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗(ELISA),。往預(yù)先包被人細胞色素C(Cyt-C)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本,、標準品,、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色,。顏色的深淺和樣品中的人細胞色素C(Cyt-C)呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度,。
 
  細胞色素試劑盒的使用方法:
  1,、樣品處理:
  ①液體食品:取約30m1樣品置于燒杯中,,加熱除去酒精或二氧化碳,,備用。
 ?、诠腆w食品:稱取搗碎的樣品約10克,,置于燒杯中,加30m1水,,搖勻后過濾,,濾液備用。
 
  2,、測定:取一燒杯,,加入處理后的樣品液10m1,加入檢測液A5滴,,搖勻,;用PH試紙沾取燒杯內(nèi)的液體檢查PH值是否在8-9之間,如未到,,再滴入檢測液A調(diào)整到PH值在8-9之間,,然后加檢測試棉B少許,令其浸入液體中,,在90-100℃的水浴中加熱,,1分鐘后攪拌試棉并將液體中的檢測試棉B取出,,用清水漂洗試棉,如試棉染上的顏色不褪的為非食用色素,。為便于判斷,,可取檢測試棉B少許,用水浸濕后對比觀察,。
 
  細胞色素試劑盒的注意事項:
  1,、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
 
  2、濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,,洗滌時不影響結(jié)果。
 
  3,、各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣,。
 
  4,、請每次測定的同時做標準曲線,做復(fù)孔,。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)后再測定,,計算時請乘以總稀釋倍數(shù),。

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