波氏桿菌通用PCR檢測試劑盒實驗反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物,、酶,、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度,。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列,， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp,，常用為20bp左右,。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段,。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜,，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶,。ATGC隨機分布,，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),，避免兩條引物間互補,，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體,，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,，特別是末及倒數(shù)第二個堿基,，應(yīng)嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗,。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處,。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性,。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol,，以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,，且可增加引物之間形成二聚體的機會,。
綿羊白介素2(IL-2)elisa試劑盒
綿羊主要組織相容性復(fù)合體(MHC)elisa試劑盒
綿羊白介素6(IL-6)elisa試劑盒
綿羊白介素1β(IL-1β)elisa試劑盒
綿羊白介素1(IL-1)elisa試劑盒
綿羊補體片段3b受體(C3bR)elisa試劑盒
綿羊白介素2受體(IL-2R)elisa試劑盒
猴白介素4(IL-4)elisa試劑盒
猴白介素2(IL-2)elisa試劑盒
猴Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa試劑盒
猴Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)elisa試劑盒
猴透明質(zhì)酸(HA)elisa試劑盒
猴β2微球蛋白(BMG/β2-MG)elisa試劑盒
猴B病毒(BV)elisa試劑盒
猴載脂蛋白B100(apo-B100)elisa試劑盒
猴載脂蛋白A1(apo-A1)elisa試劑盒
猴白介素6(IL-6)elisa試劑盒
猴γ干擾素(IFN-γ)elisa試劑盒
猴胰島素(INS)elisa試劑盒
11
立即詢價
您提交后,，專屬客服將第一時間為您服務(wù)