NOD樣受體1elisa試劑盒的性能:
準確性:標準品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,。
靈敏度:檢測濃度小于0.1pg/mL。
特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng),。
重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10%,、板間變異系數(shù)小于15%。
貯藏:2-8℃,,避光防潮保存,。
NOD樣受體1elisa試劑盒的操作流程如下:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,,每種樣品設(shè)3個平行孔,;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl,;另設(shè)一個空白對照孔,,加入純細胞裂解液100μl。
?。?)酶標板置4℃,,包被過夜。
?。?)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,,產(chǎn)品僅用于科研用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),,之后將洗滌液注滿板孔,,浸泡1-2分鐘,間歇搖動,。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干,。重復(fù)洗滌3-4次。
?。?)陰性對照孔每孔加入PBS50μl,,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
?。?)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),,孵育60min,。
(6)洗板,。
?。?)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液100μl。
?。?)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),,孵育60min。
?。?)洗板,。
(10)每孔加TMB顯色液100μl,,輕輕混勻10s,,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
?。?1)每孔加100μl2mol/LH2SO4終止反應(yīng)。
?。?2)分別測450nm吸光值W1和630nm吸光值W2,,測得的OD值為兩者之差,以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾,。
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